BPS Bioscience CD40 - HEK293 细胞系：TNF受体家族成员功能探究

CD40，作为肿瘤坏死因子受体超家族的成员，最初是在B淋巴细胞上被发现的。然而，其他细胞类型，如单核细胞、嗜碱细胞、树突状细胞、内皮细胞和上皮细胞，也被发现表达CD40。在许多人类癌症中，包括HCT116（一种结肠癌细胞系），也检测到高水平的CD40。与CD4+ T辅助淋巴细胞上的CD40配体（CD40L，CD154）相互作用，会触发细胞间粘附分子（ICAM）和其他促炎细胞因子的表达。CD40：CD40L信号同时增加了抗原特异性T细胞的激活。CD40还能激活依赖NF-κB的信号，以响应革兰阴性细菌病原体上的脂多糖（LPS）。激动型CD40单克隆抗体已被证明能激活抗原呈递细胞（APC），促进抗肿瘤T细胞反应，并培养细胞毒性髓样细胞，这表明在缺乏T细胞免疫的情况下控制癌症的潜在机制。

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描述

重组HEK293细胞系表达全长人类CD40（肿瘤坏死因子受体超家族成员5；TNFRSF5），Genbank登录号NP_001241.1。通过实时定量PCR和西方印迹确认表达。

应用

由于HEK293细胞系不表达内源性CD40，CD40 HEK293细胞系是监测CD40特异性信号响应，如潜在CD40激动型单克隆抗体引起的NF-κB激活的理想选择。

宿主细胞

人类胚胎肾细胞系（HEK293）。贴壁上皮细胞。

格式

每瓶含有约2 x 10^6个细胞，悬浮于1毫升含10% DMSO的FBS中。

储存

收到后立即在液氮中保存。

培养基

解冻培养基1（BPS Bioscience #60187）：MEM培养基（Hyclone #SH30024.01）补充10% FBS（Thermo Fisher, Cat. #26140079）、1%非必需氨基酸（Hyclone #SH30238.01）、1 mM Na焦磷酸盐（Hyclone #SH30239.01）、1%青霉素/链霉素（Hyclone SV30010.01）。

生长培养基1F（BPS Bioscience #79540）：解冻培养基1，外加100 ?g/ml潮霉素B（Thermo Fisher, Cat. #10687010）。

图1. CD40/HEK293稳定细胞表面CD40表达。流式细胞仪显示APC偶联的抗人CD40抗体，克隆HB14（Biolegend, Cat #313008）检测CD40阳性细胞（绿色），以未修饰的HEK293细胞（蓝色）作为阴性对照。

文献参考：

1. Diaconu I. et.al. (2012) Immune Response is an Important Aspect of the Anti-tumor Effect Produced by a CD40L-Encoding Oncolytic Adenovirus. Cancer Res. 72: 2327.

2. Yacoub D et.al. (2013) CD154 is Released from T-cells by a Disintegrin and Metalloproteinase Domain-containing Protein 10 (ADAM10) and ADAM17 in a CD40 Protein-dependent Manner. J. Biol. Chem. 288: 36083.

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