BPS Bioscience Anti-H3K4ac多克隆抗体免疫荧光实验分析

针对组蛋白H3在赖氨酸4位点乙酰化（H3K4ac）的多克隆抗体，使用KLH偶联的合成肽作为免疫原。

作为BPS Bioscience在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BPS Bioscience热销产品Anti-H3K4ac多克隆抗体。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

Anti-H3K4ac多克隆抗体：

克隆性：多克隆  

宿主物种/表达系统：兔  

纯化方法：亲和纯化  

形式：水溶液缓冲液  

配方：含有0.05%叠氮化物和0.05% ProClin 300的PBS溶液  

浓度：50 ?g/34 ?l  

免疫原：合成肽  

储存/稳定性  

在–80°C下可保存长达2年。首次解冻后离心以最大化产品回收。分装以避免反复冻融循环。分装可在–20°C下保存至少一个月。

染色质免疫沉淀（ChIP）结果  

使用野生型（WT）和H3K4R突变型S. pombe细胞，针对H3K4ac的抗体（产品编号25251）以及优化的qPCR引物对进行染色质免疫沉淀（ChIP）实验。实验中使用10 ?g DNA对应的剪切染色质和0.5 ?g抗体。通过qPCR分析，使用特异性引物检测两个不同的近着丝粒重复区域和常染色质adh1基因。图1显示了回收率，以输入DNA的百分比表示（免疫沉淀DNA与输入DNA的相对量）。

抗体滴度测定  

通过ELISA实验测定抗体滴度，使用针对H3K4ac的抗体（产品编号25251）的系列稀释液，并在抗原包被的孔中进行检测。实验中使用的抗原是含有目标组蛋白修饰的肽段。通过绘制抗体稀释度与吸光度的关系图（图2），估算纯化抗体的滴度为1:27,800。

交叉反应性测试  

通过点样（Dot Blot）分析测试针对H3K4ac的抗体（产品编号25251）与其他组蛋白H3修饰以及未修饰H3K4序列的交叉反应性。将含有相应修饰的肽段（100至0.2 pmol）点样于膜上，抗体稀释度为1:10,000。图3显示该抗体对目标修饰具有高度特异性。

Western Blot分析  

使用针对H3K4ac的抗体（产品编号25251）对HeLa细胞的组蛋白提取物（15 ?g）进行Western Blot分析，抗体稀释度为1:500，使用含有5% BSA的TBS-Tween缓冲液。左侧显示分子量标记（单位：kDa），右侧标记了目标蛋白的位置。

免疫荧光实验  

野生型和H3K4R突变型S. pombe细胞用针对H3K4ac的抗体（产品编号25251）（红色）和Hoechst染色（蓝色，左侧）进行染色，或单独使用H3K4ac抗体（右侧）。抗体稀释度为1:300。

应用  

- 染色质免疫沉淀（ChIP）：0.5 ?g/ChIP  

- 酶联免疫吸附试验（ELISA）：1:500  

- 点样（Dot Blot，DB）：1:10,000  

- Western Blot（WB）：1:500  

- 免疫荧光（IF）：1:300  

运输温度：–20°C或–80°C  

物种反应性：人、酵母  

注意事项：每IP的最佳抗体用量应由最终用户确定。建议测试1–5 ?g/IP。  

警告：避免反复冻融循环。  

科学分类：抗体  

监管状态：仅限研究使用

BPS Bioscience是一家通过ISO 9001:2015认证的生命科学领域的供应商，公司一直致力于开发药物研发领域的重组蛋白酶、蛋白酶活性/抑制剂筛选试剂盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年创立，从创立至今一直致力于提供药物研发领域的创新解决方案，以推动新的药物发现a。公司主要关注的领域包括免疫疗法、表观遗传学、新型冠状病毒、CRISPR、细胞信号转导等，主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、组蛋白去甲基化酶、组蛋白甲基化转移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。 

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