BPS Bioscience Anti-H3K36me3多克隆抗体：优化免疫沉淀与荧光检测

针对组蛋白H3在赖氨酸36位点三甲基化（H3K36me3）的多克隆抗体，使用KLH偶联的合成肽作为免疫原。  

作为BPS Bioscience在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BPS Bioscience热销产品Anti-H3K36me3多克隆抗体。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

Anti-H3K36me3多克隆抗体：

克隆性：多克隆  

宿主物种/表达系统：兔  

纯化方法：亲和纯化  

形式：水溶液缓冲液  

配方：含有0.05%叠氮化物和0.05% ProClin 300的PBS溶液  

浓度：50 ?g/56 ?l  

免疫原：合成肽  

背景：H3K36的三甲基化与活跃转录区域相关。  

储存/稳定性：  

在–80°C下可保存长达2年。首次解冻后离心以最大化产品回收。分装以避免反复冻融循环。分装可在–20°C下保存至少一个月。

染色质免疫沉淀测序（ChIP-seq）结果  

使用针对H3K36me3的抗体（产品编号25250）进行染色质免疫沉淀（ChIP），实验中使用2 ?g抗体处理来自100万HeLaS3细胞的剪切染色质。以2 ?g IgG作为阴性免疫沉淀（IP）对照。通过优化的PCR引物对，对免疫沉淀的DNA进行QPCR分析，检测活性GAPDH基因的启动子和编码区、GAPDH启动子上游1 kb区域以及活性ACTB基因的编码区（图1A）。随后，免疫沉淀的DNA在Illumina基因组分析仪上进行分析。文库制备、簇生成和测序均按照制造商的说明进行。使用ELAND算法将36 bp标签与人类基因组对齐。图1B展示了12号染色体（包括GAPDH阳性对照）、7号染色体（包括ACTB阳性对照）、14号染色体和3号染色体的基因组区域结果。这些结果清楚地显示了H3K36me3在活性基因上的富集。

染色质免疫沉淀（ChIP）结果  

使用HeLa细胞、针对H3K36me3的抗体（产品编号25250）和优化的qPCR引物集进行ChIP实验。实验中使用来自100万细胞的剪切染色质。抗体用量分别为1、2、5和10 ?g/ChIP进行梯度实验分析。以2 ?g IgG作为阴性免疫沉淀（IP）对照。通过QPCR分析检测活性GAPDH基因的启动子和编码区、GAPDH启动子上游1 kb区域以及Sat2卫星重复序列的DNA回收率，以输入DNA的百分比表示。

抗体滴度测定  

通过ELISA实验测定抗体滴度，使用针对H3K36me3的抗体（产品编号25250）的系列稀释液和粗制血清。实验中使用含有目标组蛋白修饰的肽段作为抗原。通过绘制抗体稀释度与吸光度的关系图（图3），估算纯化抗体的滴度为1:19,300。

交叉反应性测试  

通过点样（Dot Blot）分析测试针对H3K36me3的抗体（产品编号25250）与其他H3和H4修饰以及未修饰序列的交叉反应性。将含有相应组蛋白修饰的肽段（100至0.2 pmol）点样于膜上，抗体稀释度为1:20,000。图4显示该抗体对目标修饰具有高度特异性。

Western Blot分析  

使用针对H3K36me3的抗体（产品编号25250）对HeLa细胞的组蛋白提取物（15 ?g）进行Western Blot分析，抗体稀释度为1:1,000，使用含有5%脱脂奶粉的TBS-Tween缓冲液。右侧标记了目标蛋白的位置，左侧显示了分子量标记（单位：kDa）。

应用  

- 染色质免疫沉淀/染色质免疫沉淀测序（ChIP/ChIP-seq）：1 – 2 ?g/ChIP  

- 酶联免疫吸附试验（ELISA）：1:500  

- 点样（Dot Blot，DB）：1:20,000  

- Western Blot（WB）：1:1,000  

运输温度：–20°C或–80°C  

物种反应性：人  

注意事项：每IP的最佳抗体用量应由最终用户确定。建议测试1–5 ?g/IP。  

警告：避免反复冻融循环。  

科学分类：抗体  

监管状态：仅限研究使用

BPS Bioscience是一家通过ISO 9001:2015认证的生命科学领域的供应商，公司一直致力于开发药物研发领域的重组蛋白酶、蛋白酶活性/抑制剂筛选试剂盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年创立，从创立至今一直致力于提供药物研发领域的创新解决方案，以推动新的药物发现a。公司主要关注的领域包括免疫疗法、表观遗传学、新型冠状病毒、CRISPR、细胞信号转导等，主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、组蛋白去甲基化酶、组蛋白甲基化转移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。 

作为BPS Bioscience在中国的区域代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BPS Bioscience以及客户订制化服务。