L32(50S核糖体蛋白L32)编码叶绿体核糖体蛋白L33,它是核糖体复合体大亚基的组成部分。
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抗L32| 50 S核糖体蛋白L32(叶绿体) | AS22-4864 | 查看 |
抗L32| 50 S核糖体蛋白L32(叶绿体):
免疫原:来源于拟南芥L32蛋白序列的KLH偶联肽,UniProt: P61847 和 P12198,TAIR: ATCG01020
宿主:兔
克隆性:多克隆
纯度:抗原亲和纯化的血清,pH 7.4的PBS中
格式:冻干
数量:50 ?g
复溶:复溶时加入50 ?l无菌或去离子水。
储存:冻干/复溶后储存于-20°C;复溶后分装以避免反复冻融。请在打开前短暂离心试管,以避免冻干物质粘附在试管盖或侧壁而导致损失。
已测试应用:Western blot (WB)
推荐稀释度:1:1000 (WB)
预期 | 表观分子量:6 kDa
已确认反应性:拟南芥、烟草
预测反应性:甘蓝型油菜、豌豆、番茄、马铃薯
未反应性:目前没有已知的与预测反应性不符的例外情况
样品:
1 - 10 ?g烟草野生型全叶提取物
2 - 10 ?g烟草Rpl32过表达全叶提取物,含有天然叶绿体Rpl32(6.3 kDa)和融合蛋白Rpl32-YFP(33.2 kDa)
3 - 10 ?g烟草野生型根提取物,作为不含叶绿体蛋白的阴性对照
标记:分子量标记
烟草叶和根蛋白是从烟草(Nicotiana tabacum)新鲜提取的(提取缓冲液成分:0.7 M蔗糖,0.5 M Tris,50 mM EDTA,0.1 M KCl,2% β-巯基乙醇,2%完全蛋白酶抑制剂),充分混合后加入等体积的苯酚,在0.1 M NH4OAc的甲醇中沉淀,并在10% SDS中重悬。然后用1体积的2x蛋白上样缓冲液(125 mM Tris-HCl(pH 6.8),4% SDS,20%甘油,25 mM EDTA,0.4 mg/ml溴酚蓝,2% β-巯基乙醇)在64°C/10分钟下变性。10 ?g/孔的蛋白样品在12% SDS-PAGE上分离,并在低温下以20 V/过夜转移到0.2 ?m孔径的硝酸纤维素膜上,使用:低温湿转移。膜用4%牛奶在室温下搅拌1小时封闭。膜在1:1000稀释的一抗中在4°C/过夜搅拌孵育。倒掉抗体溶液,膜短暂冲洗两次,然后在室温下用TBS-T搅拌洗涤3次,每次10分钟。膜在匹配的二抗(Agrisera抗兔IgG辣根过氧化物酶偶联)中在TBS-T中稀释至1:10000,在室温下搅拌孵育1小时。膜按上述方法洗涤,并用以下化学发光检测试剂显影。曝光时间为30秒。
感谢博士生Jinghan Liu和德国马克斯·普朗克研究所的Reimo Zoschke博士提供
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