GAPDH(甘油醛-3-磷酸脱氢酶(叶绿体))是一种参与光合还原戊糖磷酸途径(Calvin Benson循环)的酶。蛋白质属于甘油醛-3-磷酸脱氢酶家族。
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抗gapdh|甘油醛-3-磷酸脱氢酶(叶绿体) | AS22-4848 | 查看 |
抗gapdh|甘油醛-3-磷酸脱氢酶(叶绿体):
免疫原:来源于拟南芥GAPDH的KLH偶联肽,UniProt: P25857, TAIR: At1g42970
宿主:兔
克隆性:多克隆
纯度:血清
格式:冻干
数量:50 ?l
复溶:复溶时加入50 ?l无菌或去离子水。
储存:冻干/复溶后储存于-20°C;复溶后分装以避免反复冻融。请在打开前短暂离心试管,以避免冻干物质粘附在试管盖或侧壁而导致损失。
已测试应用:Western blot (WB)
推荐稀释度:1:1000 (WB)
预期 | 表观分子量:42.4 | 36.3 kDa(由于N端处理)
已确认反应性:菠菜
预测反应性:拟南芥、甘蓝型油菜、烟草、番茄、马铃薯、豌豆、大麦、水稻、玉米
未反应性:目前没有已知的与预测反应性不符的例外情况
不同浓度的纯化菠菜AB-GAPDH酶(0.32、0.8、2和5 ?g/孔)和来自菠菜叶片的蛋白提取物(8、20、50和125 ?g/孔)在12% SDS-PAGE上分离,并转移到0.2 ?m的硝酸纤维素膜上,使用TransBlot(BioRad)。膜用Red-Ponceau染色,然后在室温下用含有5%脱脂奶粉的TBST封闭1小时。封闭后,膜在4°C/过夜条件下与Agrisera一抗(1:1000稀释)在含有1%牛奶的TBST中孵育,同时持续搅拌。孵育后,膜在室温下用含有1%牛奶的TBST洗涤5次,每次10分钟,然后与Agrisera二抗(抗兔IgG辣根过氧化物酶偶联,AS09 602)在1:25000稀释下孵育90分钟。然后膜在含有1%牛奶的TBST和TBST中各洗涤5次,每次10分钟,然后在Agrisera ECLBright(AS16 ECL-N)中孵育2分钟。信号使用LAS500仪器(Cytiva)在曝光30秒和80秒后获取。
GAPDH酶的纯化方法参考Fermani等人(2007)。
感谢西班牙纳瓦拉大学的Aitziber Calleja博士提供
附加信息:建议使用纯化的叶绿体样本与该抗体一起使用。
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