PAR单克隆抗体10H：DNA损伤、PARP激活与细胞凋亡研究的核心工具

一、产品概述

由艾美捷代理Enzo推出的Poly(ADP-ribose) 单克隆抗体（克隆号 10H，货号 ALX-804-220）是一种针对聚腺苷二磷酸核糖（PAR）的特异性抗体。PAR 由核内 DNA 修复酶——聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）激活后合成。PARP 被 DNA 链断裂选择性激活，催化长支链 PAR 添加到多种核蛋白上，其中最显著的是 PARP 自身。活细胞中 DNA 损伤后形成的 PAR 量与损伤程度成正比。在 DNA 损伤条件下，PAR 周转迅速，半衰期仅为数分钟，可被聚腺苷二磷酸核糖水解酶（PARG）快速水解并转化为游离 ADP-核糖。在大量 DNA 损伤（如 γ 辐照或氧化应激）后，PAR 可在最初 10 分钟内被检测到，随后消失。在角质形成细胞中，MAb 10H 已被证明可在 UVB 照射后早至 4 小时检测到凋亡，优于 DNA laddering 和 TUNEL 检测法。

二、生物学背景

由于细胞凋亡过程中内切酶介导的 DNA 断裂数量极大，PARP 在所谓“执行阶段”被强烈激活。在 DNA 损伤诱导的凋亡中，这代表 PAR 合成的“第二轮”。凋亡过程中合成的 PAR 显得异常稳定。PAR 免疫荧光在凋亡中出现的时间至少与 caspase-3 对 PARP 的特异性切割一样早。多项研究显示，这种 PAR 免疫荧光与其他凋亡标志物具有良好的相关性。Poly(ADP-ribose) 单克隆抗体（10H）可用于流式细胞术。此外，已有文献描述了使用该抗体进行细胞聚腺苷二磷酸核糖基化能力的定量非同位素免疫斑点杂交方法。

三、产品优势

1. 凋亡检测更灵敏：在 UVB 诱导的角质形成细胞凋亡中，早至照射后 4 小时即可检测到，优于传统 DNA laddering 和 TUNEL 法。

2. 与经典凋亡标志物高度相关：PAR 免疫荧光与 caspase-3 切割 PARP 等凋亡标志物出现时间相当，相关性良好。

3. 多平台兼容：支持流式细胞术、免疫细胞化学、免疫组化和 Western Blot。

4. 广谱物种反应性：识别人、小鼠、大鼠及果蝇等多种 PARP 合成的 PAR。

5. 定量检测能力：可用于定量评估细胞聚腺苷二磷酸核糖基化能力的非同位素免疫斑点杂交方法。

6. 无忧质量保证：产品享受无忧质量保证。

四、产品规格

别名：PAR

克隆号：10H

宿主：小鼠

同种型：IgG3

免疫原：纯化的聚腺苷二磷酸核糖

形式：液体，溶于 50mM HEPES（pH 7.4），含 100mM 氯化钠、1% BSA 和 0.02% 叠氮化钠

纯度：经 Protein A 亲和纯化自培养上清

物种反应性：果蝇、人、小鼠、大鼠

特异性：识别人、小鼠、大鼠或果蝇 PARP 等多种 PARP 合成的聚腺苷二磷酸核糖

五、应用方向与建议条件

流式细胞术

免疫细胞化学：5-20 ?g/ml

免疫组化（石蜡切片）：稀释缓冲液为含 5% 脱脂奶粉的 PBS，终浓度 5-20 ?g/ml

Western Blot：2.5 ug/ml 于含 0.05% Tween20、5% 脱脂奶粉的 PBS 中孵育

建议稀释度和条件不一定适用于所有应用，最佳条件需针对每个实验单独确定。

六、储存与操作

避免反复冻融。

长期储存：-20°C。

蓝冰运输。

七、总结

Poly(ADP-ribose) 单克隆抗体（10H）是研究 DNA 损伤应答、PARP 激活、细胞凋亡及聚腺苷二磷酸核糖基化修饰的关键工具。其早期凋亡检测的高灵敏度、与经典凋亡标志物的良好相关性以及多平台兼容性，使其成为 DNA 损伤与凋亡研究领域不可或缺的试剂。

RUO – 仅供研究使用。