ALPCO 啮齿动物胰岛素化学发光ELISA试剂盒(10板)检测原理&步骤说明

胰岛素小鼠/大鼠化学发光ELISA试剂盒用于定量检测大鼠和小鼠血清、血浆以及细胞培养上清液中的胰岛素。具体适用于以下样本类型：大鼠血清、大鼠肝素血浆、大鼠EDTA血浆、小鼠血清、小鼠肝素血浆和细胞培养上清液。

作为ALPCO在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品啮齿动物胰岛素化学发光ELISA试剂盒(10板)。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

啮齿动物胰岛素化学发光ELISA试剂盒(10板)检测原理：

胰岛素小鼠/大鼠化学发光ELISA是一种夹心免疫分析法。96孔微孔板用针对胰岛素的单克隆抗体包被。将标准品、对照品和样品与结合物一起加入微孔板孔中，然后在室温下于微孔板振荡器上以700-900转/分钟的速度孵育。孵育完成后，用洗涤缓冲液清洗孔并吸干。加入化学发光底物后，使用化学发光微孔板读数仪在1分钟后读取结果。生成的光强度与样品中胰岛素的含量成正比。

所需材料  

- 精密移液管，用于分装5-100微升（配一次性吸头）  

- 重复或多通道移液管，用于分装100微升  

- 用于试剂准备的容量瓶和移液管  

- 蒸馏水或去离子水，用于试剂准备  

- 微孔板清洗器或洗液瓶  

- 能达到700-900转/分钟的微孔板振荡器  

- 带化学发光检测功能的微孔板读数仪  

注意事项  

1. 本试剂盒中的人类血液制品已检测HIV（人类免疫缺陷病毒）、HBV（乙型肝炎病毒）和HCV（丙型肝炎病毒）。这些病毒的检测方法不能保证病毒的完全不存在，因此所有试剂应被视为潜在传染性物质。处理和丢弃应符合所有适用的国家和地方关于潜在生物危害物质处理的规定。  

2. 所有动物源性材料均为BSE（疯牛病）阴性。然而，所有材料仍应被视为潜在传染性物质。  

3. 避免与皮肤直接接触。  

4. 本产品不可内服。  

5. 使用本产品时，避免进食、饮水或吸烟。  

6. 不要用嘴吸取任何试剂。  

7. 本试剂盒中的试剂具有批次特异性，不得替换。  

8. 不要使用过期的试剂。  

9. 不建议更改检测程序，否则可能影响检测结果。  

10. 附录中提供了用于读取化学发光信号的仪器设置示例。每个实验室应根据仪器制造商的说明优化仪器设置。如有疑问，请联系微孔板读数仪制造商的技术支持部门以获取最佳仪器设置。

储存条件  

试剂盒应在2-8℃下储存。试剂盒在包装标签上的有效期之前是稳定的。

检测步骤  

所有试剂和微孔板条应在使用前平衡至室温。使用前轻轻混合所有试剂。每次检测运行和每块微孔板（如果一次使用多块）都必须进行标准曲线检测。所有标准品、对照品和样品应双份运行。建议的微孔板布局已提供。

1. 在打开铝箔袋之前，应将微孔板平衡至室温。为标准品、对照品和样品的双份测定准备足够的微孔板条。剩余的微孔板条应密封在含有干燥剂的铝箔袋中，于2-8℃保存。  

2. 将每个标准品、对照品和样品分别加入到相应的孔中，每孔5微升（参见试剂准备和分析证书中的对照品复溶说明）。  

3. 每孔加入75微升工作浓度的结合物（参见试剂准备部分）。  

4. 用微孔板密封膜覆盖微孔板，在室温下孵育2小时，同时在微孔板振荡器上以700-900转/分钟的速度振荡。  

5. 倒掉孔中的内容物，用微孔板清洗器用工作浓度洗涤缓冲液（参见试剂准备部分）每孔350微升清洗微孔板6次。  

a. 或者，使用配备洗液喷头的洗液瓶或手动清洗器将工作浓度洗涤缓冲液加入孔中（不建议使用多通道移液管。为确保孔的充分清洗，洗涤缓冲液必须以足够的力量均匀分配）。浸泡孔1分钟。将微孔板倒置以倒掉液体，并用力将倒置的微孔板在吸水纸上敲击。重复清洗和浸泡步骤2次，总共进行3次清洗。  

最后一次清洗（无论是自动还是手动）后，通过将微孔板倒置并用力敲击在吸水纸上，去除孔中的任何残留洗涤缓冲液和气泡。  

6. 每孔加入100微升工作浓度化学发光底物（参见试剂准备部分）。  

7. 将微孔板放入能够读取孔的化学发光信号的微孔板读数仪中。在加入化学发光底物后1分钟内读取结果，且不得超过20分钟。读取时间为1秒。

典型标准曲线  

以下结果仅用于演示目的，不能替代通过检测获得的数据。每次检测运行和每块微孔板都必须进行标准曲线检测。数据分析采用5参数曲线拟合，权重为1/y?。

文献参考：

1. Finlay JWA, Dillard RF. Appropriate Calibration Curve Fitting in Ligand Binding Assays.AAPS Journal. 2007; 9(2): E260-E267.

ALPCO产品种类多样，可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等，涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域，尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。

作为ALPCO在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的ALPCO产品。