IgG检测试剂盒是一种高灵敏度的双位点酶联免疫测定(ELISA)试剂盒,用于检测小鼠血清和血浆样本中免疫球蛋白G(IgG)的定量测定。For仅供研究使用。不用于诊断程序。
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小鼠IgG ELISA试剂盒 | ALP-41-IGGSPMS-E01 | 查看 |
小鼠IgG ELISA试剂盒检测原理:
IgG检测试剂盒是一种高灵敏度的双位点酶联免疫测定(ELISA)试剂盒,用于检测小鼠血清和血浆样本中免疫球蛋白G(IgG)的定量测定。For仅供研究使用。不用于诊断双抗体夹心ELISA的原理如图1所示。在该试验中样品中存在的IgG与吸附在聚苯乙烯微量滴定孔的表面。通过洗涤去除未结合的蛋白质后,加入与辣根过氧化物酶(HRP)结合的抗IgG抗体。这些酶被标记抗体与先前结合的IgG形成复合物。在另一个洗涤步骤之后通过添加显色底物3,3',5,5'来测定结合酶-四甲基联苯胺(TMB)。结合酶的量与浓度成正比检测样本中的IgG;因此,450nm处的吸光度是浓度的度量检测样本中的IgG。测试样本中的IgG含量可以从由标准品构建并校正样品稀释的标准曲线。
所需材料(未提供)
精密移液器(2 ?L 到 1000 ?L),用于制备和分配稀释液
试管
喷瓶或微孔洗涤器/吸引器
蒸馏水或去离子水
微孔板读数仪
用于制备试剂和缓冲液的各种玻璃器皿
计时器
抗凝剂(用于采集血浆样本)
离心机
样本采集与处理
所有血液成分和生物材料应视为潜在危险品进行处理。处理和处置时请遵循普遍预防措施。如果血样发生凝固、严重溶血、乳糜或样本完整性存在疑虑,请做记录,并谨慎解读结果。
以下样本采集和储存条件仅作为一般指导,样本的稳定性尚未评估。
血清样本:应通过静脉穿刺采集血液。血液凝固后,通过离心分离血清。取出血清后立即进行检测,或将样本分装并储存于-80°C(优选)或-20°C。避免反复冻融。
血浆样本:应将血液采集到含抗凝剂的容器中,然后进行离心。立即检测,或将样本分装并储存于-80°C(优选)或-20°C。避免反复冻融。
已知干扰物质:氮化钠和硫柳汞浓度高于0.1%会抑制酶反应。
样本稀释
该检测要求在使用前对每个测试样本进行稀释。每次进行检测时,所有样本应以重复方式检测。建议的稀释倍数仅供参考。稀释应根据未知样本的预期浓度进行,以确保稀释样本落在标准曲线的动态范围内。如果不确定样本值,强烈建议在运行整个板之前,先对一至两个代表样本进行系列稀释检测。
血清和血浆样本:推荐的起始稀释倍数为1:400,000。要制备1:400,000的稀释样本,将2 ?L的样本转移至1,998 ?L的1X稀释液中。这将产生1:1,000的稀释。接下来,将1:1,000的样本通过将2 ?L转移到798 ?L的1X稀释液中进一步稀释。这将产生1:400,000的稀释。在每个步骤中均需充分混合。
试剂准备
在使用前,将所有试剂放置至室温(16°C至25°C)。
稀释液浓缩液:提供的稀释液为5X浓缩液,需用蒸馏水或去离子水以1:5的比例稀释(1份缓冲液浓缩液,4份dH2O)。
洗涤液浓缩液:提供的洗涤液为20X浓缩液,需用蒸馏水或去离子水以1:20的比例稀释(1份缓冲液浓缩液,19份dH2O)。浓缩液在低温存储时可能会结晶。在稀释前,将浓缩液加热至30-35°C可以溶解结晶。
酶-抗体结合物:通过将10 ?L酶-抗体结合物添加到990 ?L的1X稀释液中,计算每个微孔板测试条所需的工作结合物溶液的量。使用前立即稀释并避免光照。轻轻均匀混合,避免起泡。
预涂ELISA微孔板:可直接使用。打开铝箔袋,取出板块。移除不用于检测的所有条形和孔,并将其放回袋中,连同干燥剂一起重新封口。
小鼠IgG标准品:根据批次特定的分析证书进行准备。
ALPCO产品种类多样,可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等,涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域,尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。
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