ALPCO IgG(大鼠)ELISA, 96孔样本稀释&试剂准备方案

IgG检测试剂盒是一种高灵敏度的双位点酶联免疫测定法（ELISA），用于测量大鼠血清和血浆样本中的IgG。

作为ALPCO在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品IgG(大鼠)ELISA, 96孔。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

IgG(大鼠)ELISA, 96孔检测原理：

双抗体夹心ELISA的原理如图1所示。在该检测中，样品中的IgG与已吸附在聚苯乙烯微量滴定孔表面的抗IgG抗体反应。在通过洗涤去除未结合的蛋白质后，加入与辣根过氧化物酶（HRP）偶联的抗IgG抗体。这些酶标记的抗体与先前结合的IgG形成复合物。经过另一轮洗涤后，结合的酶标记抗IgG抗体通过添加显色底物3,3',5,5'-四甲基苯胺（TMB）进行检测。结合的酶量与所测试样品中IgG的浓度成正比；因此，在450 nm处的吸光度可以用来测量测试样品中IgG的浓度。测试样品中IgG的量可以通过根据标准品构建的标准曲线进行插值得到，并已根据样品稀释进行校正。

样本收集和处理

所有血液成分和生物材料应视为潜在危险物质进行处理。在处理和处置时应遵循普遍安全预防措施。如果血样凝固、明显溶血、乳糜，或样本的完整性存在问题，请做好记录并谨慎解释结果。以下列出的样本收集和存储条件仅作为一般指南，样本的稳定性尚未评估。

血清样本：应通过静脉穿刺采集血液。血液凝固后，应通过离心分离血清与细胞。去除血清并立即检测，或分装并将样本存储于-80°C（优选）或-20°C。避免反复冻融。

血浆样本：应将血液采集到含有抗凝剂的容器中，然后离心。立即检测或分装并将样本存储于-80°C（优选）或-20°C。避免反复冻融。

已知干扰物质：浓度高于0.1%的叠氮化钠和硫柳汞会抑制酶反应。

样本稀释

该检测要求每个测试样本在使用前进行稀释。每次进行检测时，所有样本应重复检测两次。推荐的稀释比例仅为建议，稀释应基于未知样本的预期浓度，使稀释样本落在标准曲线的动态范围内。如果不确定样本值，强烈建议在运行整个板之前，先对一两个代表性样本进行系列稀释检测。

血清样本：推荐的起始稀释比例为1:80,000。要准备1:80,000的样本稀释液，将5 ?L的样本转移到995 ?L的1X稀释液中。这将得到1:200的稀释液。接下来，通过将2 ?L转移到798 ?L的1X稀释液中，将1:200的稀释液进一步稀释。这将得到最终的1:80,000稀释液。每个步骤都要充分混合。

血浆样本：推荐的起始稀释比例为1:80,000。要准备1:80,000的样本稀释液，将5 ?L的样本转移到995 ?L的1X稀释液中。这将得到1:200的稀释液。接下来，通过将2 ?L转移到798 ?L的1X稀释液中，将1:200的稀释液进一步稀释。这将得到最终的1:80,000稀释液。每个步骤都要充分混合。

试剂准备

使用前将所有试剂带至室温（16°C至25°C）。

稀释液浓缩液：所提供的稀释液为5X浓缩液，必须与蒸馏水或去离子水以1:5的比例稀释（1份缓冲液浓缩液，4份去离子水）。

洗涤液浓缩液：所提供的洗涤液为浓缩液，必须与蒸馏水或去离子水以1:20的比例稀释（1份缓冲液浓缩液，19份去离子水）。在低温储存时，浓缩液中可能会形成晶体。将浓缩液加热至30-35°C后再稀释，可以溶解晶体。

酶-抗体偶联物：通过将10 ?L酶-抗体偶联物加入990 ?L的1X稀释液，计算每个微量滴定板测试条所需的工作偶联物溶液的量。使用前立即稀释并避免光照。均匀混合，但要轻柔，避免产生泡沫。

预涂ELISA微孔板：按照提供的方式准备即可使用。打开铝箔袋，取出板。去除所有不在检测中的条和孔，将其放回袋中并与干燥剂重新封口。

大鼠IgG标定物：根据批次特定的分析证书准备。

ALPCO产品种类多样，可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等，涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域，尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。

作为ALPCO在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的ALPCO产品。