生长激素结合蛋白(GHBP)由238个氨基酸组成,包括四个糖基化位点和三个二硫键。在人类中,GHBP是通过金属蛋白酶(ADAM17)对生长激素受体进行脱落而形成的。在平衡状态下,大约50%的循环生长激素(GH)与GHBP结合,但只有2%的循环GHBP与GH分子以1:1的化学计量比结合。只有在超生理水平的GHBP情况下,才会出现2:1的比例。GH和GHBP的复合物的大致分子量为80 kDa(GHBP 60 kDa)。在动物模型(豚鼠)中,复合物的形成将半衰期从11-20分钟增加到大约100分钟,一般来说,与GHBP的结合抑制了GH的细胞作用。
GHBP生理学
GHBP浓度独立于GH的脉冲分泌,并且不显示昼夜节律。GHBP水平在生命的前2-6个月很低,在头两年急剧上升,然后直到成年早期缓慢上升。从第四个十年开始,GHBP血清浓度缓慢下降。
作为ALPCO在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品生长激素结合蛋白(GHBP) ELISA试剂盒,96孔。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
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生长激素结合蛋白(GHBP) ELISA试剂盒,96孔 | ALP-22-GHBHU-E01 | 查看 |
生长激素结合蛋白(GHBP) ELISA试剂盒,96孔检测原理:
该检测基于多克隆抗体和在真核细胞中表达的重组GHBP。GHBP的ELISA是一种所谓的三明治检测法。它利用两种特异性、高亲和力的抗体。首先,样品中的GHBP与微量滴定板上的固定抗体结合。分两步走结合生物素偶联的抗GHBP抗体和链霉抗生物素蛋白过氧化物酶。随后,过氧化物酶催化酶反应,导致蓝色。这个蓝色的强度取决于样品的GHBP含量。反应被停止
通过测量吸收来量化停止溶液的添加和颜色强度。GHBP ELISA允许安全和可重复地测量人体体液中的GHBP是研究GHBP作为能量和脂肪代谢生物标志物的合适工具。
警告和注意事项
仅限研究和专业使用。
本试剂盒仅适用于体外使用,不适用于人体和动物内部使用。严格遵循测试协议。使用试剂盒中提供的说明书的有效版本。确保已经理解所有内容。ALPCO不对因不遵守所提供说明而造成的任何损失或损害(法定要求除外)承担责任。不要使用明显损坏的、微生物污染的或已溢出的材料。
注意:本试剂盒包含人和/或动物来源的材料。因此,所有组分和样本应被视为潜在的传染性物质。在试剂盒的储存、处理和处置过程中,必须采取适当的预防措施和良好的实验室操作规范。试剂盒组分的处置必须根据当地法规进行。
人血清
以下组分含有人血清:对照血清KS、KS2和标准A-F。
本试剂盒中的对照血清的人源血清经过检测,结果对乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎病毒(HCV)和人类免疫缺陷病毒1型和2型(HIV)呈非反应性。没有已知的方法可以完全确保没有传染性病原体的存在;因此,所有组分和样本应被视为潜在的传染性物质。
标准曲线:
图1:标准曲线示例
特异性:
在GHBP ELISA中用于检测GHBP的抗体的特异性是通过尺寸排除色谱分析富集了重组生长激素的人血清(图2)以及随后使用GHBP抗体分析SEC分数来评估的。
图2:人血清中添加了3 ?g/mL重组生长激素(GH),在4°C下孵育超过20小时后,通过尺寸排除色谱(Superdex 10/300;流速:0.5 mL/min;分数大小:0.4 mL/min)分离富含的血清。在用稀释缓冲液稀释后,通过GHBP抗血清和GH ELISA测量GHBP和GH。分析显示GHBP抗体在100 kDa处检测到信号,并且一个小的肩部可以被解释为在340 kDa处的额外信号。正如预期的那样,GH在22 kDa(未结合的GH)、100 kDa处被检测到,并且在大于340 kDa处出现第二个峰。这表明GHBP抗体检测到的蛋白质与GH结合,这表明检测到的蛋白质具有GH结合特性。GH/GHBP复合物的预期分子量为80 kDa,略小于抗体检测到的GH/GHBP复合物的大小。这可能是由于方法学变异或天然GHBP的不同糖基化造成的。
ALPCO产品种类多样,可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等,涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域,尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。
作为ALPCO在中国区域的代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的ALPCO产品。
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