ALPCO高灵敏度 IGFBP-6 ELISA检测说明

IGFBP-6 ELISA用于测定人血清、血浆和细胞培养上清液样品中的胰岛素样生长因子结合蛋白6（IGFBP-6）。仅供研究使用。不用于诊断程序。

作为ALPCO在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品 IGFBP-6 ELISA。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

 IGFBP-6 ELISA检测原理：

该检测基于多克隆抗体和在真核细胞中表达的重组IGFBP-6。这是一种夹心法，利用两种高亲和力的特异性抗体。首先，样品中的IGFBP-6与微量滴定板上的固定抗体结合。在两步序列中，生物素偶联的抗IGFBP-6抗体和链霉抗生物素蛋白过氧化物酶结合。随后，过氧化物酶催化酶反应，导致蓝色。蓝色的强度取决于样品中的分析物含量。通过加入停止溶液来停止反应，并通过测量吸光度来量化颜色强度（黄色）。

样本类型

血清、血浆和细胞培养上清样本可用于本试验。研究了抗凝剂对本试剂盒中IGFBP-6测量的影响，包括相应的EDTA血浆、肝素血浆和血清样本。平均而言，EDTA（n=10）和肝素（n=5）血浆中血清IGFBP-6的恢复率分别为102%和98%。

样本收集

使用标准静脉穿刺进行血液采样。应避免溶血样本。

所需样本体积：10 ?L

样本稳定性

在密封良好的样本瓶中：

- 20-25°C储存：最多2天

- -20°C储存：至少1年

- 最多1次冷冻-解冻周期

在分离凝血和/或细胞成分后，建议尽快冷藏或冷冻样本，并避免超过1次冷冻-解冻周期。随着周期的增加，观察到样本依赖的信号增加。

干扰

通常应避免溶血、黄疸和脂血样本。通过向血清样本中添加甘油三酯、血红蛋白或胆红素，并测量IGFBP-6的恢复，进行了干扰测试。在100 mg/mL、5 mg/mL和200 ?g/mL的浓度下，未检测到显著（<30%）干扰。

样本稀释

- 稀释：用稀释缓冲液VP稀释1:51

- 在PE/PP管中取500 ?L稀释缓冲液VP（在较大的系列中推荐使用重复吸管）；加入10 ?L样本（稀释1:51）。对于双重测定，必须在试验中使用两个100 ?L的样本。

- 注意：血清和血浆样本至少需要用稀释缓冲液VP稀释1:20。

- 根据预期的IGFBP-6值，样本可以进一步稀释在稀释缓冲液中。

- 样本稀释后的稳定性：在20-25°C下最多1小时。

通过稀释（1:5至1:640）具有不同IGFBP-6含量的天然血清（样品1-3）来测试试剂盒的线性。图2显示了预期浓度和测量浓度的比较。很明显，1:10的稀释不足以使所有样品呈线性。这些结果通过统计分析符合NCCLS/CLSI EP6-A 2003标准。线性要求最小稀释度≥1:20。样品稀释的线性在标准曲线范围内是可接受的。

与理论预期浓度相比，y轴上显示了测量的IGFBP-6浓度的线性。如果稀释度为1:20，则给出浓度高达0.5 ng/mL的线性关系。

ALPCO产品种类多样，可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等，涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域，尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。

作为ALPCO在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的ALPCO产品。