蛋白质的磷酸化与去磷酸化是调节参与基因表达、细胞黏附、细胞周期、细胞增殖和分化等功能蛋白特性的重要信号机制之一。蛋白质可以通过蛋白激酶在特定的丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸残基上发生磷酸化。抗磷酸化蛋白抗体在Western Blot中的应用已成为信号转导研究的常用工具。不幸的是,各种细胞裂解液中内源性磷酸化蛋白的水平通常很低,即使使用高浓度抗体和长时间曝光,也往往难以检测到。大多数商业化的Western Blot封闭液(例如脱脂奶粉、血清)足以封闭膜上未反应的位点,减少检测过程中非特异性抗体结合的量;然而,它们并非为在转膜过程中保护磷酸化蛋白抗原而设计。
作为Cell Biolabs全国总代理,艾美捷科技强烈推荐Cell Biolabs热销产品磷酸阻断剂。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
磷酸阻断剂 | AKR-104 | 查看 |
Cell Biolabs的PhosphoBLOCKER?含有专有配方,与传统封闭液相比具有多项优势:
专为磷酸化蛋白转膜设计
在不增加背景的情况下增强低水平磷酸化蛋白信号
预混合的干粉,使用方便
方法
在TBST或PBST中新鲜配制5% PhosphoBLOCKER?溶液。使用5% PhosphoBLOCKER?溶液封闭转膜。在检测转膜时,使用5% PhosphoBLOCKER?溶液稀释一抗和二抗。
注意事项:
复溶后的PhosphoBLOCKER?溶液在4℃下仅能保存一周。
出现深色颗粒是制造过程中的正常现象,不会影响产品的性能。如果需要,可在复溶后通过标准实验室滤纸过滤去除颗粒。
结果示例
以下图表展示了典型的滴定结果。以下数据仅供参考,不应用于解释实际结果。
图1. A549细胞裂解液中Phospho-p38的Western Blot
最近的产品引用:
1. Tr?da, C. et al. (2023). Increased EGFRvIII Epitope Accessibility after Tyrosine Kinase Inhibitor Treatment of Glioblastoma Cells Creates More Opportunities for Immunotherapy. Int J Mol Sci.24(5):4350. doi: 10.3390/ijms24054350.
2. Goddi, A. et al. (2022). Laminin-α4 negatively regulates adipocyte beiging through the suppression of AMPKα in male mice. Endocrinology. doi: 10.1210/endocr/bqac154.
3. Egbert, C. et al. (2022). The integration of proteome-wide PTM data with protein structural and sequence features identifies phosphorylations that mediate 14-3-3 interactions. J Mol Biol. doi:10.1016/j.jmb.2022.167890.
4. Pinheiro, I. et al. (2022). A Nine-Strain Bacterial Consortium Improves Portal Hypertension and Insulin Signaling and Delays NAFLD Progression In Vivo. Biomedicines. 10(5):1191. doi:
10.3390/biomedicines10051191.
Cell Biolabs公司位于美国加利福尼亚州南部重要的工业城市圣迭戈(San Diego),是有名的细胞学试剂品牌,作为前沿的细胞学分析检测试剂盒生产商,为生物技术和研究类客户提供好的基于细胞功能研究以及疾病等方面的高端产品和技术服务。产品主要涵盖细胞研究、细胞信号通路和蛋白质生物学、代谢研究、病原体和毒素、干细胞研究等领域。全球众多大学、政府研究机构、生物、制药企业的科研实验室均在使用Cell Biolabs的产品。
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