德州红-X 活性酯（单一异构体形式），红色荧光标记升级方案

一、产品概述

Texas Red-X NHS 酯（Texas Red-X, succinimidyl ester）是一种胺反应性红色荧光染料，为 Invitrogen 旗下 Texas Red 商标染料的升级替代产品。该产品由艾美捷代理AAT Bioquest推出，货号：AAT-474，通过琥珀酰亚胺酯（NHS 酯）官能团与蛋白质、抗体等生物分子上的伯胺基团共价偶联，用于制备明亮红色荧光生物偶联物，广泛应用于免疫荧光和流式细胞术等检测场景。

二、光谱特性与荧光性能

参数 | 数值

激发峰 | 586 nm

发射峰 | 603 nm

外观 | 紫色固体

分子量 | 816.94 Da

溶解性 | 溶于 DMSO

储存条件 | 冷冻（<-15°C），严格避光

有效期 | 收货后 12 个月

Texas Red-X NHS 酯的激发/发射峰位于约 586/603 nm，处于橙色至红色光谱区域，适用于配备标准 TRITC 或 Texas Red 滤光片组的荧光显微镜和流式细胞仪。其荧光亮度优异，光稳定性良好，是多色成像实验中红色通道的可靠选择。

三、核心结构优势：X 间隔臂

相较于普通 Texas Red 染料，该产品的关键结构差异在于荧光团与 NHS 酯基团之间存在一个**七原子氨基己酰间隔臂**（“X” spacer）。这一设计具有以下功能意义：

特性 | 优势

减少空间位阻 | 间隔臂将荧光团推离生物分子表面，降低染料与抗体/蛋白质之间的立体干扰

保持生物活性 | 染料远离抗原结合位点或酶活性中心，标记后的抗体/蛋白质更可能保留天然功能

提高标记效率 | 间隔臂使 NHS 酯基团更易接近伯胺靶点，偶联产率显著高于无间隔臂的 Texas Red

四、单一异构体 vs. 混合异构体

产品类型 | 特点

混合异构体（#474） | 5- 和 6- 位异构体混合物，标记产物不均一

单一异构体（本产品） | 纯化 5- 异构体，标记产物具有更高的一致性和可重复性

对于需要精确控制标记度和产物均一性的实验（如定量流式分析、标准化免疫荧光染色），单一异构体形式可显著减少批间差异，提升数据可靠性。

五、操作要点

1. 用 DMSO 复溶后分装储存于 -15°C 以下，避免反复冻融

2. 标记反应推荐在 pH 8.0–8.5 的碳酸氢盐缓冲液中进行

3. 反应体系应避免含伯胺基团的缓冲剂（如 Tris、甘氨酸）

4. 标记完成后需通过脱盐柱或透析去除游离染料

综上，Texas Red-X NHS 酯（单一异构体）凭借 X 间隔臂带来的标记效率提升和单异构体赋予的产物均一性，是传统 Texas Red 染料的理想升级替代方案，适用于对偶联质量和实验重复性要求较高的红色荧光标记应用。

文献参考：

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Authors: Sanchez-Martin RM, Muzerelle M, Chitkul N, How SE, Mittoo S, Bradley M.

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