Helixyte?Green dsDNA定量检测试剂盒可用于在ssDNA、RNA和游离核苷酸存在的情况下选择性检测低至25 pg/ml的dsDNA。Helixyte?Green在与dsDNA结合后表现出显著的荧光增强。该检测方法在三个数量级上呈线性,序列依赖性很小,使您能够准确测量来自许多来源的DNA,包括基因组DNA、病毒DNA、迷你制备DNA或PCR扩增产物。Helixyte?Green dsDNA定量分析试剂盒的灵敏度比紫外吸光度读数高几个数量级。它在等摩尔量的RNA存在下对dsDNA具有特异性。该试剂盒具有强大的混合读取格式,与96孔和384孔荧光微孔板阅读器兼容。它也可以与台式荧光计或手持式荧光计(如Qubit荧光计)一起使用。
货号:AAT-17650
单位大小:200 测试
目录编号:17650
激发(纳米):
502
发射(纳米):
522
H-短语:H303, H313, H340
危险符号:T
预期用途:仅限研究使用(RUO)
R-短语:R20, R21, R68
UNSPSC:41116134
激发:490 纳米
发射:525 纳米
截止:515 纳米
推荐板:实心黑色
组分:
组分 A:Helixyte Green? 1 瓶(100 ?L,DMSO 中 200X)
组分 B:测定缓冲液 1 瓶(50 mL)
组分 C:牛胸腺DNA标准 1 瓶(200 ?L,100 ?g/mL)
协议概要:
加入 100 ?L dsDNA 标准品或测试样本
加入 100 ?L Helixyte Green? 工作溶液
在室温下孵化 5-10 分钟
在 Ex/Em=490/525 纳米监测荧光
重要说明:
以下是一个使用 Helixyte Green? 量化 dsDNA 的示例协议。在打开之前,请让所有组分升至室温。目前没有数据涉及 Helixyte Green?dsDNA 染色剂的致突变性或毒性。由于这种试剂与核酸结合,应将其视为潜在的致突变物,并进行适当处理。DMSO 库存溶液应特别小心处理,因为 DMSO 已知能促进有机分子进入组织。
dsDNA 标准:
将 2 ?L 的 100 ?g/mL dsDNA 库存溶液(组分 C)加入到 198 ?L 的测定缓冲液(组分 B)中,以获得 1 ?g/mL dsDNA 溶液,然后进行 1:2 连续稀释以获得连续稀释的 dsDNA 标准(DS7 - DS1)。
工作溶液的准备:
通过将 50 ?L 的 Helixyte Green?(组分 A)加入到 10 mL 的测定缓冲液(组分 B)中来准备 Helixyte Green? 工作溶液。用箔纸覆盖或将其置于暗处以保护工作溶液不受光线影响。注意:建议在塑料容器而不是玻璃容器中准备此溶液,因为染料可能会吸附到玻璃表面。为了获得最佳结果,应在制备后几小时内使用此溶液。
图:使用Helixyte Green?(蓝色)和Invitrogen?Quant-iT?PicoGreen?dsDNA试剂(红色)比较dsDNA剂量反应。dsNDA标准品在试管中孵育,并使用varian cary eclipse荧光分光光度计进行测量。
Helixyte绿色荧光dsDNA定量试剂盒文献参考:
Inhibitors of Streptococcus pneumoniae surface endonuclease EndA discovered by high-throughput screening using a PicoGreen fluorescence assay
Authors: Peterson EJ, Kireev D, Moon AF, Midon M, Janzen WP, Pingoud A, Pedersen LC, Singleton SF.
Journal: J Biomol Screen (2013): 247
Validation of a PicoGreen-based DNA quantification integrated in an RNA extraction method for two-dimensional and three-dimensional cell cultures
Authors: Chen Y, Sonnaert M, Roberts SJ, Luyten FP, Schrooten J.
Journal: Tissue Eng Part C Methods (2012): 444
Characterization of PicoGreen interaction with dsDNA and the origin of its fluorescence enhancement upon binding
Authors: Dragan AI, Casas-Finet JR, Bishop ES, Strouse RJ, Schenerman MA, Geddes CD.
Journal: Biophys J (2010): 3010
Comparison of SYBR Green I-, PicoGreen-, and [3H]-hypoxanthine-based assays for in vitro antimalarial screening of plants from Nigerian ethnomedicine
Authors: Abiodun OO, Gbotosho GO, Ajaiyeoba EO, Happi CT, Hofer S, Wittlin S, Sowunmi A, Brun R, Oduola AM.
Journal: Parasitol Res (2010): 933
Metal-enhanced PicoGreen fluorescence: application to fast and ultra-sensitive pg/ml DNA quantitation
Authors: Dragan AI, Bishop ES, Casas-Finet JR, Strouse RJ, Schenerman MA, Geddes CD.
Journal: J Immunol Methods (2010): 95
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