HRP标记山羊抗小鼠IgA重链特异性多克隆抗体，高亲和力，背景干净灵敏度高

一、产品概述

IgA是一种以二聚体形式存在并通过J链连接的免疫球蛋白，主要分布于机体的黏膜表面，包括肠道、呼吸系统、眼睛以及初乳中。根据存在形式，IgA可分为分泌型IgA（存在于黏膜区域）和血清型IgA（存在于血清中）。在免疫学检测中，特异性识别IgA重链的标记抗体是研究黏膜免疫、抗体应答及IgA相关疾病的关键工具。

本文介绍的艾美捷代理Bethyl Laboratories推出的产品为HRP（辣根过氧化物酶）标记的山羊抗小鼠IgA重链多克隆抗体（货号：A90-103P），经亲和纯化及固相吸附处理以确保类特异性。该抗体适用于酶联免疫吸附测定（ELISA）、免疫细胞化学（ICC）、免疫组化（IHC）及免疫印迹（WB）等多种检测平台。

二、核心规格参数

参数 | 详细信息

靶标 | 小鼠IgA重链

反应性 | 小鼠

应用 | ELISA, ICC, IHC, WB

宿主 | 山羊

克隆性 | 多克隆

形式 | 全IgG

同型 | IgG

标记 | HRP（辣根过氧化物酶）

纯度 | 抗原亲和纯化

抗原物种 | 小鼠

浓度 | 1 mg/ml

储存条件 | 2 - 8 °C

保质期 | 收货后1年

缓冲液 | 磷酸盐缓冲液（PBS），含0.2% BSA及0.05% Pro-Clean 400

三、免疫原与特异性

生产与纯化工艺

本抗体通过以下步骤制备：首先使用小鼠IgA免疫山羊，收集抗血清。为确保类特异性，抗血清经过固相吸附处理，去除与其他免疫球蛋白（IgM、IgG亚类、IgE）交叉反应的抗体。随后，通过亲和层析法进行纯化：将小鼠IgA抗原偶联至琼脂糖珠，从抗血清中特异性捕获识别IgA重链的抗体。纯化后的抗体与辣根过氧化物酶（HRP）进行化学交联偶联，酶/抗体蛋白的摩尔比为4:1。

特异性验证

经免疫电泳和ELISA验证，本抗体特异性识别小鼠IgA重链。与以下小鼠免疫球蛋白及亚类的交叉反应率小于1%：

小鼠IgM

小鼠IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG2c、IgG3

小鼠IgE

这一高特异性确保了在复杂样本（如血清、培养上清、组织裂解液）中能够准确检测IgA，避免因非特异性结合导致的假阳性或背景过高。

四、重要注意事项

某些杂交瘤细胞克隆可能表达异常的免疫球蛋白相关肽段，这些肽段可能被本抗体错误识别。在检测杂交瘤培养上清中的IgA时，建议同时设置适当的阴性对照（如亲本骨髓瘤细胞上清）以排除假阳性。

五、HRP标记与浓度测定

标记特征

本抗体为HRP直接偶联物，无需再使用二抗孵育步骤，简化了实验流程，减少了非特异性背景。HRP具有高催化活性，可与多种底物（如TMB、DAB、ECL）反应产生可检测信号，适用于比色、化学发光等多种检测模式。

浓度测定

标记前的免疫球蛋白浓度采用比尔定律测定。标准条件下，1 mg/mL IgG在280 nm波长处的吸光度（A280）为1.4。本抗体浓度为1 mg/ml（即1000 ?g/ml）。HRP偶联后，抗体浓度仍以IgG质量计为1 mg/ml。

酶/抗体比例

本产品中HRP与抗体的摩尔比为4:1。这一比例在保证高信号强度的同时，避免了过度标记导致的抗体亲和力下降，实现了灵敏度与特异性的平衡。

六、应用与实验条件

重要提示

并非所有列出的应用均已在本实验室经过具体测试。用户需根据自身实验体系进行优化和验证。以下推荐条件基于产品说明及行业通用经验。

推荐稀释比例

应用 | 推荐稀释比例 | 说明

ELISA | 1:10,000 - 1:100,000 | 作为检测抗体，建议从1:20,000开始优化

免疫细胞化学（ICC） | 1:200 - 1:2,000 | 用于细胞爬片或培养细胞的IgA染色

免疫组化（IHC） | 1:200 - 1:2,000 | 适用于冷冻切片或FFPE组织切片

免疫印迹（WB） | 1:2,000 - 1:20,000 | 检测还原或非还原条件下的IgA重链

七、产品使用与储存

储存注意事项

抗体应储存于2 - 8°C，请勿冷冻。反复冻融会导致HRP活性丧失及抗体聚集。本抗体以液体形式提供，缓冲液为PBS，含0.2% BSA作为稳定蛋白，以及0.05% Pro-Clean 400作为防腐剂（替代叠氮化钠，因叠氮化物会抑制HRP活性）。

稳定性与保质期

自收货之日起，在推荐的储存条件下保质期为1年。避免光照和高温。建议分装为单次使用量（如10 ?l/管）储存于2-8°C，避免反复开盖引入污染。

HRP标记抗体的特殊注意事项

避免叠氮化物：HRP酶活性受叠氮化钠抑制。实验体系中不得使用含叠氮化钠的缓冲液。本抗体已使用Pro-Clean 400替代叠氮化钠，用户自备的洗涤液、封闭液等亦需注意。

避光保存：HRP偶联物对光敏感，应避免长时间暴露于强光下。

显色底物：使用新鲜配制的底物溶液，确保显色反应的一致性和灵敏度。