兔抗CPSF160抗体亲和纯化，IHC/IP/WB三平台验证，C端表位特异性富集

产品概述

本品为艾美捷Bethyl Laboratories推出的兔源多克隆抗体（货号：A301-580A），特异性靶向人源CPSF160蛋白（又称CPSF1，切割与多聚腺苷酸化特异性因子1的160 kDa亚基）。该抗体经抗原亲和纯化，以完整IgG形式提供，适用于免疫组织化学（IHC）、免疫沉淀（IP）和蛋白质印迹（WB）实验，可识别小鼠及人类样本中的CPSF160蛋白。

靶点背景：CPSF160与mRNA 3’端加工

CPSF160是切割与多聚腺苷酸化特异性因子（CPSF）复合物的核心亚基。该复合物由CPSF160、CPSF100、CPSF73和CPSF30四个蛋白组成，在哺乳动物mRNA前体的3’端加工过程中发挥关键作用。

功能机制：

CPSF160负责识别前体mRNA上的AAUAAA多聚腺苷酸化信号

与切割刺激因子（CstF）协同作用，共同识别顺式作用元件

决定切割位点并引导后续的多聚腺苷酸化反应

别名：CPSF 160 kDa subunit、CPSF160、HSU37012、P/cl.18、polyadenylation specificity factor

抗体特性规格

参数 规格

靶点 CPSF160 (CPSF1)

宿主 兔

克隆性 多克隆

形式 完整IgG

同种型 IgG

偶联物 非偶联

纯度 抗原亲和纯化

浓度 200 ?g/ml

抗原物种 人

反应性 小鼠、人

免疫原信息：

抗体识别的表位位于人CPSF160蛋白第1393位氨基酸至C末端之间。具体区域对应NCBI条目NP_037423.1编号中的第1392-1442位氨基酸。

储存与稳定性

储存温度：2-8°C（请勿冷冻）

有效期：自收货之日起1年

缓冲液：Tris缓冲盐水，含0.1% BSA及0.09%叠氮钠

> 注意：叠氮钠作为防腐剂，如需进行活细胞实验或体内注射，应通过透析或超滤去除。

应用方法与实验条件

蛋白质印迹（WB）

推荐稀释度：1:2000 1:10000

通用流程要点：

封闭液及抗体稀释液：5% Milk-TBST

一抗孵育：过夜

二抗选择：

细胞裂解液WB：使用山羊抗兔IgG重链和轻链抗体（A120-101P）

免疫沉淀物WB：使用抗兔IgG轻链HRP偶联抗体，封闭液中需添加5%正常猪血清（货号S100-020），以降低重链干扰

免疫沉淀（IP）

使用剂量：6 ?g抗体/mg细胞裂解液

免疫组织化学（IHC）

推荐稀释度：1:100 1:500

抗原修复：对于福尔马林固定、石蜡包埋（FFPE）组织切片，推荐使用柠檬酸缓冲液（pH 6.0）进行热诱导抗原修复。

适用样本：经验证可检测人及小鼠组织中的CPSF160表达。

生产与质控

纯化工艺：使用固相载体固定的CPSF160特异性表位进行亲和纯化，确保抗体识别目标区域的高特异性。

浓度测定：基于比尔定律，以1 mg/ml IgG在A280波长下吸光度为1.4作为计算基准。

应用注意事项

1. 多平台验证：本品经验证可用于IHC、IP和WB三种应用场景，不同应用需分别优化条件。IHC实验中务必进行抗原修复。

2. WB稀释范围较宽（1:2000-1:10,000），建议根据目标蛋白丰度进行梯度预实验。CPSF160为相对高表达的加工因子，推荐从中高稀释度开始尝试。

3. IP实验中建议设置正常兔IgG作为同型对照，以排除非特异性结合背景。按6 ?g/mg裂解液用量加入抗体后，可使用Protein A/G琼脂糖珠进行捕获。

4. IHC使用FFPE切片时，除柠檬酸修复外，若信号较弱可尝试EDTA修复（pH 8.0-9.0），但优先推荐pH 6.0柠檬酸缓冲液。

5. 储存期间避免反复温度波动，2-8°C恒温保存，请勿分装后反复冻融。

6. 叠氮钠存在条件下，如需进行辣根过氧化物酶（HRP）检测，叠氮钠会抑制HRP活性，建议在二抗孵育前充分洗涤去除。

相关产品推荐

山羊抗兔IgG重链和轻链抗体（A120-101P）——用于细胞裂解液WB检测

抗兔IgG轻链HRP偶联抗体——用于免疫沉淀物WB检测，有效避免重链干扰

正常猪血清（S100-020）——用于IP-WB封闭液添加，降低非特异性信号

研究应用场景

本抗体适用于以下研究方向：

mRNA 3’端加工机制研究

CPSF复合物各亚基的相互作用分析

不同细胞类型或疾病状态下CPSF160的表达水平检测

免疫沉淀联合质谱鉴定CPSF复合物相互作用蛋白

组织切片中CPSF160的定位分析

本品经验证可同时识别人和小鼠来源的CPSF160，且兼容三种主流检测平台，为RNA加工领域的基础与转化研究提供了可靠的工具。建议使用者根据具体实验体系对抗体稀释度及抗原修复条件进行个性化优化，以获得最佳的检测效果。