兔抗PML抗体亲和纯化：用于免疫沉淀及免疫组化研究

一、产品概述

PML（早幼粒细胞白血病蛋白）是一种多功能蛋白，属于RBCC/TRIM家族成员，具有RING指结构域、B-box和卷曲螺旋结构域。PML参与肿瘤生长抑制、造血分化、基因转录、凋亡诱导及病毒免疫等多种生物学过程。PML基因常与视黄酸受体α基因发生染色体易位，形成的PML-视黄酸受体融合蛋白与急性早幼粒细胞白血病的发生密切相关。

本文介绍的由艾美捷代理Bethyl Laboratories推出的兔抗PML抗体（亲和纯化）（货号：A301-167A）是一款针对人源PML蛋白的高特异性多克隆抗体，适用于免疫组化、免疫沉淀和免疫印迹等多种应用场景。

二、产品规格

参数 详细信息

靶标 PML

反应种属 人

宿主 兔

克隆类型 多克隆

抗体形式 完整IgG

免疫原 PML蛋白400-450位氨基酸区域内的表位（具体映射至NP_150241.2编号下残基375-425之间）

同种型 IgG

偶联物 未偶联

纯度 抗原亲和纯化

抗原种属 人

浓度 200 ug/mL

储存条件 2–8°C

保质期 自收到之日起1年

缓冲液 Tris缓冲盐水，含0.1% BSA及0.09% 叠氮化钠 |

生产流程 使用固定在固相载体上的PML特异性表位进行亲和纯化 |

浓度测定方法：采用比尔定律测定免疫球蛋白浓度，其中1 mg/mL IgG在A280下的吸光度为1.4。

三、推荐应用与实验条件

本抗体经验证可用于以下三种应用类型，推荐稀释比例及关键实验条件如下。

3.1 免疫印迹（Western Blot, WB）

推荐稀释范围：1:2,000 – 1:10,000

封闭及抗体稀释液：5% 牛奶-TBST

一抗孵育条件：过夜孵育

二抗选择：

检测细胞裂解液：使用山羊抗兔IgG（重链+轻链）抗体（货号A120-101P）

检测免疫沉淀样品：使用抗兔IgG轻链HRP偶联抗体，封闭缓冲液中需添加5%正常猪血清（货号S100-020）

3.2 免疫组化（Immunohistochemistry, IHC）

推荐稀释范围：1:500 – 1:2,000

抗原修复：推荐使用pH 6.0的柠檬酸缓冲液进行热诱导抗原修复（适用于福尔马林固定、石蜡包埋组织切片）

3.3 免疫沉淀（Immunoprecipitation, IP）

推荐用量：6 ug 抗体 / mg 细胞裂解物总蛋白

四、储存与稳定性

储存温度：2–8°C

有效期：自收到之日起1年内，按照指示条件储存可保持最佳性能

缓冲液成分说明：含0.09%叠氮化钠作为防腐剂。请注意，叠氮化钠会干扰某些酶标记检测系统（如HRP），若后续使用HRP偶联二抗，需在实验前通过透析或脱盐去除叠氮化钠

避免反复冻融：建议分装保存，避免多次冻融导致抗体活性下降

五、背景信息

5.1 PML蛋白的结构与功能

PML（早幼粒细胞白血病蛋白）是RBCC/TRIM家族成员，其结构特征包括：

RING指结构域：介导蛋白-蛋白相互作用及E3泛素连接酶活性

B-box结构域：参与锌离子结合和蛋白折叠

卷曲螺旋结构域：介导同源或异源二聚体形成

PML在细胞核内形成名为“PML核体”的亚核结构，该结构是多种信号通路的整合平台。PML参与以下关键生物学过程：

肿瘤生长抑制

造血细胞分化

基因转录调控（作为转录共调节因子）

凋亡诱导

抗病毒免疫应答

5.2 PML与疾病的关系

急性早幼粒细胞白血病：PML基因与视黄酸受体α基因发生染色体易位t(15;17)(q24;q21)，产生PML-RARA融合蛋白。该融合蛋白干扰正常PML核体形成及视黄酸信号通路，导致早幼粒细胞分化阻滞和恶性增殖。全反式维甲酸和三氧化二砷可通过靶向降解PML-RARA融合蛋白实现治疗作用。

其他疾病：PML功能异常也见于实体瘤、自身免疫性疾病及病毒感染等病理状态。