兔抗SMARCB1/SNF5抗体亲和纯化，高纯度无杂，靶向特异性强

一、产品概述

由艾美捷Bethyl Laboratories推出的为针对SMARCB1/SNF5（亦称INI1、BAF47）的兔源多克隆抗体（货号：A301-087A），经抗原亲和纯化，适用于免疫组化（IHC）、免疫沉淀（IP）及Western Blot（WB）检测。SMARCB1是人SWI/SNF染色质重塑复合物的核心亚基，在调控基因转录、细胞分化和肿瘤抑制中发挥关键作用。该基因突变或缺失与恶性横纹肌样瘤（MRT）、非典型畸胎样/横纹肌样瘤（AT/RT）等多种恶性肿瘤密切相关。

二、关键规格参数

参数 | 详细信息

靶标 | SMARCB1 / SNF5 / INI1 / BAF47

反应性 | 小鼠、人

宿主 | 兔

克隆性 | 多克隆

免疫原 | 人SMARCB1蛋白第100至150位氨基酸之间的区域（实际表位位于75-125区间）

亚型 | IgG

纯化方式 | 抗原亲和纯化

浓度 | 1000 ?g/ml

存储条件 | 2 - 8 °C

保质期 | 收货后1年

缓冲液 | Tris-柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液，pH 7-8，含0.09%叠氮化钠

三、免疫原与特异性识别

本抗体识别的表位位于人SMARCB1蛋白第75至125位氨基酸残基之间（参考编号NP_003064.2，GeneID 6598）。该区域对应SMARCB1蛋白的N末端结构域，避开了与其它SWI/SNF家族亚基高度同源的区域，确保特异性识别。

抗体通过固相载体上固定的SMARCB1/SNF5特异性表位进行亲和纯化，有效去除非特异性抗体。免疫球蛋白浓度采用比尔定律测定（1 mg/mL IgG在A280处吸光度为1.4）。

种属交叉反应性：已验证反应性包括人和小鼠，适用于两个物种的样本检测。

四、应用方法与推荐条件

4.1 Western Blot（WB）

参数 | 条件

稀释比例 | 1:2000 - 1:10,000

封闭/稀释液 | 5% 脱脂牛奶-TBST

一抗孵育 | 过夜孵育

二抗（细胞裂解液WB） | 山羊抗兔IgG重链和轻链抗体（货号A120-101P）

二抗（免疫沉淀物WB） | 抗兔IgG轻链HRP结合抗体，封闭液中添加5%正常猪血清（货号S100-020）

操作提示：SMARCB1在多种细胞系中广泛表达（分子量约44 kDa），推荐起始稀释度为1:2000。若信号过强，可上调至1:5000-1:10000。建议使用HeLa、HEK293或小鼠NIH/3T3细胞裂解液作为阳性对照。

4.2 免疫沉淀（IP）

参数 | 条件

推荐用量 | 6 ?g 抗体 / mg 细胞裂解蛋白

该用量可在人或小鼠细胞裂解液中有效富集SMARCB1及其结合的SWI/SNF复合物。若目的为分析复合物中其他亚基（如BRG1、BRM），建议使用非变性裂解缓冲液。

4.3 免疫组化（IHC）

参数 | 条件

稀释比例 | 1:1000 - 1:5000

抗原修复 | 推荐使用柠檬酸盐缓冲液（pH 6.0）进行热诱导抗原修复

样本类型 | 福尔马林固定、石蜡包埋（FFPE）组织切片

操作提示：SMARCB1在正常细胞核中呈均匀强阳性表达，在横纹肌样瘤中因基因缺失而完全丢失。本抗体可有效区分SMARCB1表达正常（核阳性）与完全缺失（核阴性）的样本，是临床诊断AT/RT和MRT的重要工具。建议使用扁桃体或正常脑组织作为阳性对照，横纹肌样瘤组织作为阴性对照。稀释比例可从1:1000起始，根据信号强度上调至1:5000，背景极低。

五、生物学功能

SMARCB1/SNF5/INI1是人SWI/SNF（亦称BAF）染色质重塑复合物的核心核心亚基，主要功能包括：

染色质重塑：作为SWI/SNF复合物的必需组分，利用ATP水解能量重塑核小体结构，调控基因的可及性

转录调控：参与多种发育相关基因、肿瘤抑制基因的转录激活或抑制

细胞周期调控：通过与p53、RB等通路相互作用，控制G1/S检查点

肿瘤抑制：SMARCB1是经典肿瘤抑制基因，双等位基因失活导致横纹肌样瘤易感性

六、存储与稳定性

存储温度：2 - 8°C，请勿冷冻。高浓度（1000 ?g/ml）配方在冷藏条件下极为稳定，避免反复开盖。

保质期：收货后1年内保持完整活性。

防腐剂：含0.09%叠氮化钠，可抑制微生物污染。若下游应用涉及HRP检测，叠氮化钠会抑制过氧化物酶活性，需通过透析或脱盐柱去除。

缓冲液体系：Tris-柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液（pH 7-8），兼容多数免疫检测体系。

本产品适用于染色质生物学、肿瘤病理学、表观遗传调控及发育相关研究领域。