一、产品概述
由艾美捷Bethyl Laboratories推出的hnRNP-H抗体(货号A300-511A)是一款针对人及小鼠异质核核糖核蛋白H(hnRNP-H/HNRNPH1)的兔源多克隆抗体,由美国制造,采用抗原亲和纯化工艺制备。该抗体以未偶联的完整IgG形式提供,浓度为1000 ?g/ml,适用于免疫组织化学(IHC)、免疫沉淀(IP)和免疫印迹(WB)等多种应用场景,是RNA代谢、前体mRNA加工及剪接调控研究的重要工具。
二、技术规格
参数 | 详细信息
靶标 | hnRNP-H(HNRNPH1)
反应性 | 人、小鼠
宿主 | 兔
克隆性 | 多克隆
格式 | 完整IgG
亚型 | IgG
偶联物 | 未偶联
纯度 | 抗原亲和纯化
抗原物种 | 人
浓度 | 1000 ?g/ml
保存条件 | 2-8°C
有效期 | 收货后1年
缓冲液 | Tris-柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液,pH 7-8,含0.09%叠氮化钠
三、免疫原与纯化工艺
该抗体识别的表位位于人hnRNP-H1蛋白第400位氨基酸至C末端(第448位残基)之间(编号参考NP_005511.1,GeneID 3187)。表位覆盖了hnRNP-H的C端区域,该区域富含甘氨酸和精氨酸,参与RNA结合及蛋白-蛋白相互作用。
纯化方式:使用固相载体上固定的hnRNP-H特异性表位进行抗原亲和纯化
浓度测定:通过比尔定律测定,1 mg/mL IgG在280 nm波长下的吸光度为1.4
四、产品背景
hnRNP-H的分子功能
异质核核糖核蛋白H(hnRNP-H)属于一组广泛表达的hnRNP家族蛋白,这些蛋白能够结合异质核RNA(hnRNA)并形成复合物,在前体mRNA加工和运输中发挥关键作用。hnRNP-H特异性地结合前体mRNA上的顺式作用元件,通过影响小核核糖核蛋白(snRNP)的结合,作为剪接辅助因子参与可变剪接调控。
结构与亚型
HNRNPH1基因编码的蛋白包含三个RNA识别基序(RRM),赋予其对富含G的序列(尤其是GGG重复)的高亲和力。hnRNP-H在多种组织中普遍表达,参与调控基因表达的多层次过程,包括转录、剪接、多聚腺苷酸化、mRNA输出及翻译。
五、病理生理学意义
hnRNP-H功能失调与多种疾病相关,包括癌症(如胶质瘤、肝癌)、神经退行性疾病(如脊髓性肌萎缩症)及肌肉萎缩症。其参与可变剪接调控的特性使其成为精准医学研究的热点靶点。
六、应用方法与实验条件
免疫印迹(WB)
推荐稀释比:1:10,000 - 1:30,000(极高稀释比,说明亲和力优异)
封闭与稀释液:5% 牛奶-TBST
一抗孵育:过夜孵育
细胞裂解物检测:使用山羊抗兔IgG重轻链抗体(A120-101P)
免疫沉淀物检测:使用抗兔IgG轻链HRP偶联抗体,封闭缓冲液中需添加5%正常猪血清(货号S100-020)
预期分子量:hnRNP-H蛋白分子量约49 kDa。在WB中可能观察到约49 kDa的单一主带,以及因可变剪接或翻译后修饰产生的额外条带。
免疫沉淀(IP)
推荐用量:6 ?g抗体 / mg裂解物
免疫组织化学(IHC)
推荐稀释比:1:500 - 1:2000
抗原修复:推荐使用柠檬酸盐缓冲液(pH 6.0)进行热诱导抗原修复
样本类型:福尔马林固定、石蜡包埋(FFPE)组织切片
物种反应性
本抗体经验证可识别人(Human)和小鼠(Mouse)来源的hnRNP-H蛋白。基于表位序列的高度保守性,预测也可与大鼠等其它哺乳动物反应,但需实验验证。
七、储存与稳定性
存放于2-8°C,严禁冷冻。反复冻融会导致抗体聚集和活性丧失
抗体在叠氮化钠存在下可稳定保存1年
取用时应使用无菌吸头,避免微生物污染
如需长期保存,可分装后添加等体积甘油存放于-20°C,但产品说明书未明确推荐此方式,优先按指示保存

微信扫码在线客服