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兔抗hnRNP-H抗体亲和纯化,实现FFPE组织核定位精准检测

发布者:艾美捷科技    发布时间:2026-04-21     
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一、产品概述

由艾美捷Bethyl Laboratories推出的hnRNP-H抗体(货号A300-511A)是一款针对人及小鼠异质核核糖核蛋白H(hnRNP-H/HNRNPH1)的兔源多克隆抗体,由美国制造,采用抗原亲和纯化工艺制备。该抗体以未偶联的完整IgG形式提供,浓度为1000 ?g/ml,适用于免疫组织化学(IHC)、免疫沉淀(IP)和免疫印迹(WB)等多种应用场景,是RNA代谢、前体mRNA加工及剪接调控研究的重要工具。

 

二、技术规格

参数 | 详细信息

靶标 | hnRNP-H(HNRNPH1)

反应性 | 人、小鼠

宿主 | 兔

克隆性 | 多克隆

格式 | 完整IgG

亚型 | IgG

偶联物 | 未偶联

纯度 | 抗原亲和纯化

抗原物种 | 人

浓度 | 1000 ?g/ml

保存条件 | 2-8°C

有效期 | 收货后1年

缓冲液 | Tris-柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液,pH 7-8,含0.09%叠氮化钠

 

三、免疫原与纯化工艺

该抗体识别的表位位于人hnRNP-H1蛋白第400位氨基酸至C末端(第448位残基)之间(编号参考NP_005511.1,GeneID 3187)。表位覆盖了hnRNP-H的C端区域,该区域富含甘氨酸和精氨酸,参与RNA结合及蛋白-蛋白相互作用。

纯化方式:使用固相载体上固定的hnRNP-H特异性表位进行抗原亲和纯化

浓度测定:通过比尔定律测定,1 mg/mL IgG在280 nm波长下的吸光度为1.4

 

四、产品背景

hnRNP-H的分子功能

异质核核糖核蛋白H(hnRNP-H)属于一组广泛表达的hnRNP家族蛋白,这些蛋白能够结合异质核RNA(hnRNA)并形成复合物,在前体mRNA加工和运输中发挥关键作用。hnRNP-H特异性地结合前体mRNA上的顺式作用元件,通过影响小核核糖核蛋白(snRNP)的结合,作为剪接辅助因子参与可变剪接调控。

结构与亚型

HNRNPH1基因编码的蛋白包含三个RNA识别基序(RRM),赋予其对富含G的序列(尤其是GGG重复)的高亲和力。hnRNP-H在多种组织中普遍表达,参与调控基因表达的多层次过程,包括转录、剪接、多聚腺苷酸化、mRNA输出及翻译。

 

五、病理生理学意义

hnRNP-H功能失调与多种疾病相关,包括癌症(如胶质瘤、肝癌)、神经退行性疾病(如脊髓性肌萎缩症)及肌肉萎缩症。其参与可变剪接调控的特性使其成为精准医学研究的热点靶点。

 

六、应用方法与实验条件

免疫印迹(WB)

推荐稀释比:1:10,000 - 1:30,000(极高稀释比,说明亲和力优异)

封闭与稀释液:5% 牛奶-TBST

一抗孵育:过夜孵育

细胞裂解物检测:使用山羊抗兔IgG重轻链抗体(A120-101P)

免疫沉淀物检测:使用抗兔IgG轻链HRP偶联抗体,封闭缓冲液中需添加5%正常猪血清(货号S100-020)

预期分子量:hnRNP-H蛋白分子量约49 kDa。在WB中可能观察到约49 kDa的单一主带,以及因可变剪接或翻译后修饰产生的额外条带。

免疫沉淀(IP)

推荐用量:6 ?g抗体 / mg裂解物

免疫组织化学(IHC)

推荐稀释比:1:500 - 1:2000

抗原修复:推荐使用柠檬酸盐缓冲液(pH 6.0)进行热诱导抗原修复

样本类型:福尔马林固定、石蜡包埋(FFPE)组织切片

物种反应性

本抗体经验证可识别人(Human)和小鼠(Mouse)来源的hnRNP-H蛋白。基于表位序列的高度保守性,预测也可与大鼠等其它哺乳动物反应,但需实验验证。

 

七、储存与稳定性

存放于2-8°C,严禁冷冻。反复冻融会导致抗体聚集和活性丧失

抗体在叠氮化钠存在下可稳定保存1年

取用时应使用无菌吸头,避免微生物污染

如需长期保存,可分装后添加等体积甘油存放于-20°C,但产品说明书未明确推荐此方式,优先按指示保存


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