产品概述
本品为艾美捷Bethyl Laboratories推出的兔源抗MCM5多克隆抗体(货号:A300-195A),采用表位特异性亲和纯化工艺制备,以完整IgG形式提供。该抗体针对人MCM5蛋白N端第1至50位氨基酸残基之间的表位设计,能够特异性识别MCM5而不受MCM复合物中其他亚基(MCM2、3、4、6、7)的干扰。该抗体适用于人源及小鼠源样本的检测,在DNA复制、细胞周期调控及转录调控等研究领域具有广泛应用价值。
MCM5(微小染色体维持复合物组分5)是MCM复合物(MCM2-7六聚体)的核心亚基之一。该复合物作为复制许可的关键调控因子,确保真核细胞DNA在每个细胞周期中仅复制一次。此外,MCM5还参与转录调控,与STAT1相互作用,对干扰素诱导的靶基因转录具有不可或缺的作用。
核心规格参数
参数 | 具体信息
靶标 | MCM5
反应种属 | 小鼠、人
应用 | IHC、IP、WB
宿主 | 兔
克隆性 | 多克隆
抗体形式 | 完整IgG
免疫原 | MCM5第1至50位氨基酸
亚型 | IgG
标记物 | 未偶联
纯度 | 抗原亲和纯化
抗原种属 | 人
浓度 | 1000 ?g/ml(1 mg/ml)
储存 | 2 8 °C
有效期 | 自收货之日起1年
缓冲液 | Tris-柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液,pH 7-8,含0.09%叠氮化钠
储存与稳定性
储存温度:2 8 °C
有效期:1年
缓冲体系:Tris-柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液(pH 7-8),含0.09%叠氮化钠
叠氮化钠作为防腐剂存在。在使用HRP标记二抗进行检测时,需注意叠氮化钠对过氧化物酶的抑制作用。如需进行细胞活性实验或功能性研究,建议通过透析或超滤去除叠氮化钠。
推荐应用与稀释度
以下为经过验证或推荐的应用条件:
应用类型 | 推荐稀释度/用量 | 关键条件
免疫组织化学(IHC) | 1:500 1:2,000 | 推荐使用柠檬酸盐缓冲液pH 6.0进行抗原修复(FFPE切片)
免疫沉淀(IP) | 6 ?g/mg裂解物 | 可高效下拉MCM2-7复合物
蛋白质印迹(WB) | 1:5,000 1:20,000 | 5% Milk-TBST封闭和稀释,一抗孵育过夜
MCM5生物学背景与应用价值
MCM5在DNA复制中的核心功能
MCM2-7复合物是复制许可系统的核心组件,在G1期被加载到染色质上,形成复制前复合物(pre-RC)。进入S期后,复合物被激活,作为解旋酶驱动DNA复制叉前进。MCM5在这一过程中发挥以下作用:
1. 复合物组装:MCM5与MCM3形成亚复合物,是MCM2-7六聚体组装的必要步骤
2. 解旋酶活性调控:MCM5参与调节MCM复合物的ATP酶和解旋酶活性
3. 复制许可限制:通过细胞周期依赖性的染色质加载与卸载,确保每个复制起点在每个周期内仅启动一次DNA复制
MCM5的异常表达与多种病理状态相关:
肿瘤标志物:MCM5在多种恶性肿瘤(如乳腺癌、结直肠癌、肺癌、前列腺癌)中过表达,与增殖指数(Ki-67)高度相关,且在某些情况下具有更好的预后预测价值
发育异常:MCM5基因突变与微头畸形侏儒症(MGORS8)相关
MCM5在转录调控中的非复制功能
近年研究发现,MCM5还具有独立于DNA复制的转录调控功能:
STAT1相互作用:MCM5与信号转导和转录激活因子1(STAT1)直接相互作用
干扰素应答:MCM5对STAT1靶基因的转录至关重要,敲减MCM5会显著削弱干扰素γ诱导的基因表达
提示意义:在非增殖细胞(如终末分化细胞或静止期细胞)中检测到MCM5表达时,可能反映了其在转录调控中的作用,而非复制活性
本抗体的研究应用场景
研究领域 | 应用方式 | 目的
细胞周期调控 | WB检测细胞周期同步化样本中的MCM5表达 | 分析MCM5在G1/S期的表达和染色质加载动态
复制许可分析 | IP下拉MCM2-7复合物 | 检测不同细胞周期阶段复合物的组成和修饰状态
肿瘤标志物验证 | IHC检测临床FFPE组织切片 | 评估MCM5作为增殖标志物的诊断或预后价值
干扰素信号通路 | 共IP检测MCM5-STAT1相互作用 | 验证病毒或干扰素处理对复合物形成的影响
发育遗传学 | IHC/WB检测MCM5突变模型 | 研究MCM5在神经发育和侏儒症中的机制
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