一、产品概述
本文介绍的是由艾美捷Bethyl Laboratories推出的一款针对神经纤维蛋白1(Neurofibromin 1,NF1)的高亲和力兔多克隆抗体(货号:A300-140A)。该抗体适用于小鼠及人源样本的免疫沉淀(IP)和免疫印迹(WB)检测,由美国生产,采用抗原亲和纯化工艺制备,以完整IgG形式提供,未偶联任何标记物。
神经纤维蛋白1由NF1基因编码,是一种关键的Ras信号通路负调控因子。该基因的失活突变可导致1型神经纤维瘤病(NF1),临床表现为施万细胞神经纤维瘤、牛奶咖啡斑及虹膜良性错构瘤(Lisch结节)。因此,可靠的特异性抗体对于NF1相关基础研究与临床转化具有重要意义。
二、产品详细规格
参数 | 详细信息
靶标 | Neurofibromin 1
反应种属 | 小鼠、人
应用 | IP, WB
宿主 | 兔
克隆性 | 多克隆
形式 | 完整IgG
免疫原 | 第2789位至C端之间的区域
亚型 | IgG
偶联物 | 未偶联
纯度 | 抗原亲和纯化
免疫原种属 | 人
浓度 | 1000 ?g/ml
存储条件 | 2 - 8 °C
有效期 | 收货后1年
缓冲液 | Tris-柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液,pH 7-8,含0.09%叠氮化钠
三、抗原表位及生产信息
该抗体识别的人源神经纤维蛋白1表位位于第2760残基至C端(第2818残基)之间,参考序列号为NP_000258.1(GeneID 4763)。免疫原为第2789位至C端的区域。
纯化工艺采用固相载体固定的表位特异性亲和层析,确保抗体特异性。免疫球蛋白浓度通过比尔定律测定(1 mg/mL IgG在280 nm处的吸光度为1.4)。产品另提供A300-140A-T型号,其识别表位与A300-140A相同。
四、应用方法与推荐条件
4.1 免疫印迹(WB)
通用条件
所有WB实验均采用含5%脱脂牛奶的TBST作为封闭液及抗体稀释液。一抗孵育时间为过夜。
推荐稀释比:1:1000 至 1:10,000
推荐凝胶:3-8% Tris-乙酸酯凝胶
检测体系
细胞裂解液WB:使用山羊抗兔IgG(重链+轻链)二抗(货号A120-101P)。
免疫沉淀产物WB:使用抗兔IgG轻链HRP偶联二抗,封闭缓冲液中需添加5%正常猪血清(货号S100-020)以降低背景。
4.2 免疫沉淀(IP)
推荐用量:6 ?g 抗体 / mg 蛋白裂解液
操作时请根据样本总蛋白量换算所需抗体体积。由于抗体浓度为1000 ?g/ml,即6 ?g对应6 ?l抗体。
五、储存与稳定性
未稀释抗体应在2-8°C条件下储存,切勿冷冻。自收货之日起,在推荐条件下可稳定保存1年。缓冲液中含有0.09%叠氮化钠作为防腐剂,使用前请注意实验体系对叠氮化钠的兼容性(如细胞实验需透析去除)。
六、背景知识与功能意义
神经纤维蛋白1是由NF1基因编码的大型细胞质蛋白,广泛表达于神经系统等多种组织。其核心功能是通过GTP酶活化蛋白(GAP)结构域加速Ras-GTP水解为Ras-GDP,从而负向调控Ras介导的细胞增殖、分化和存活信号。
NF1失活的病理后果
当NF1发生杂合性失活突变时,细胞内活性Ras-GTP水平持续升高,驱动施万细胞等异常增殖,最终形成神经纤维瘤。1型神经纤维瘤病为常染色体显性遗传病,发病率约1:3000,除肿瘤易感性外,患者还常伴有学习障碍、骨发育异常等。
七、研究应用价值
该抗体可识别靠近C端的表位(2760-2818),适用于检测全长神经纤维蛋白1(分子量约220 kDa)及其C端截短突变体。在神经纤维瘤病机制研究、Ras信号通路分析以及药物筛选模型中,该抗体可作为有效的检测工具。

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