羊抗牛IgG重链抗体亲和纯化，有效规避轻链交叉干扰，提升检测准确性

本品为艾美捷Bethyl Laboratories推出的多克隆抗体（货号：A10-118P），特异性识别牛免疫球蛋白G（IgG）的重链表位。宿主选用绵羊，经抗原亲和纯化获得完整IgG分子，未偶联任何标记物（Unconjugated），浓度为1 mg/mL。

产品规格与理化参数

参数项目 详细规格

目标抗原 牛IgG重链

反应种属 牛

宿主来源 绵羊

克隆类型 多克隆

抗体形式 完整IgG

亚型 IgG

偶联物 无

纯度 抗原亲和纯化

抗原物种 牛

工作浓度 1 mg/mL

保存条件 2–8 °C

有效期限 自收货起1年

缓冲体系 含0.09%叠氮化钠的磷酸盐缓冲液（PBS）

浓度测定依据：采用比尔定律（Beer’s Law）计算免疫球蛋白浓度，标准为1 mg/mL IgG在280 nm波长处的吸光值（A280）为1.4。

生产纯化流程：

1. 固相吸附处理抗血清，确保类别特异性

2. 使用琼脂糖珠偶联的抗原进行亲和层析分离

3. 经免疫电泳和ELISA双重验证，本品与牛IgG反应具有特异性

适用范围与推荐稀释比例

重要提示：并非所有列出的应用均已由生产实验室逐一验证。首次使用建议进行梯度稀释预实验。

应用技术 推荐稀释范围 备注

酶联免疫吸附测定（ELISA） 1:1,000 – 1:30,000 包被板适用：1:100 – 1:500

免疫细胞化学（ICC） 1:200 – 1:2,000 —

免疫组织化学（IHC） 1:200 – 1:2,000 —

蛋白质印迹（WB） 1:1,000 – 1:30,000 —

应用选择建议：

高灵敏度检测（WB/ELISA）：推荐起始稀释度1:5,000，根据信号强度向上或向下调整

细胞或组织染色（ICC/IHC）：起始稀释度1:500较为稳妥，背景过高时可提高至1:1,000

ELISA包被：使用高浓度区间（1:100–1:500）确保抗原捕获效率

反应特异性与交叉反应说明

特异性验证：

经免疫电泳和ELISA双重确认，本抗体特异性识别牛IgG分子

针对重链设计，去除与轻链的反应性，避免轻链交叉干扰

可能存在的交叉反应：

本品可能与其他物种的IgG发生交叉反应

若用于非牛样本（如羊、马、猪等），建议预先进行交叉反应测试

设计原理：  

IgG是血液/血浆中主要的免疫球蛋白，功能包括中和毒素、激活补体、固定病原体、诱导调理作用和细胞介导的细胞毒性。抗重链抗体专门识别IgG分子的重链区域，避免与轻链非特异性结合，从而在多重染色或轻链表达紊乱样本中提供更准确的检测结果。

储存与稳定性管理

储存条件：

温度：2–8 °C（切勿冷冻，冷冻会导致蛋白变性及抗体活性丧失）

容器：分装保存可减少反复取用造成的污染风险

避光：无需特殊避光，但建议存放于原装瓶或密闭管中

稳定性保障：

有效期：自收货之日起12个月

防腐剂：缓冲液内含0.09%叠氮化钠，有效抑制微生物生长

避免反复冻融：如须长期保存，建议分装后置-20°C（但需注意部分活性可能损失，以2–8°C为首选）

操作注意事项

1. 稀释液选择：推荐使用含1% BSA或5%脱脂牛奶的PBS/Tween-20作为稀释液，降低非特异性吸附

2. 阳性对照：建议使用牛血清或纯化牛IgG作为阳性对照样本

3. 阴性对照：使用同型对照抗体（绵羊IgG）或预吸附抗体评估背景水平

4. 孵育条件：室温1–2小时或4°C过夜均可，低温过夜通常可获得更高信噪比

5. 洗涤缓冲液：PBST（含0.05% Tween-20）推荐洗涤3–5次，每次5分钟

安全信息：  

缓冲液中含有叠氮化钠，作为防腐剂使用时浓度较低（0.09%），但仍具毒性。操作时佩戴手套，避免接触皮肤或粘膜。废液应按实验室危险化学品规定处理。

典型实验流程示意：

封闭 → 一抗（本品，按推荐稀释度）→ 洗涤 → 二抗（抗绵羊IgG标记物）→ 检测

本品适用于牛免疫球蛋白相关研究、牛源抗体检测、疫苗效价评估、兽医诊断以及基础免疫学中IgG重链的功能分析。