GPX4荧光检测试剂盒，促进细胞氧化应激研究

谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）属于谷胱甘肽过氧化物酶家族，该家族由八个成员（GPX1-8）组成。 GPX4的独特之处在于它是家族中唯一的单体成员，并且可以在细胞膜中发挥作用。它通过防止膜脂质过氧化来对抗细胞氧化应激。哺乳动物的GPX4在其催化位点含有一个硒代半胱氨酸，这对于反应的发生至关重要，因此它是一种硒蛋白。在小鼠中敲除GPX4会导致胚胎致死，这表明其在细胞保护免受脂质过氧化氢损伤中具有独特的作用，并且参与的途径有限。GPX4功能障碍会导致脂质过氧化物的积累，最终导致铁死亡（ferroptosis）细胞死亡。GPX4在癌细胞中含量较高，有助于对拉帕替尼、帕博西尼等抗癌药物产生耐药性。通过（1S,3R）-RSL3抑制GPX4可降低耐药癌细胞的活性，并在小鼠模型中减少肿瘤体积。作为铁死亡的关键调节因子和癌基因，GPX4是癌症治疗中的一个有前景的治疗靶点。

GPX4荧光测定试剂盒是一种荧光测定法，旨在用于筛选和鉴定应用中测量谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）的活性。 该试剂盒采用便捷的96孔板格式，包含足够的纯化重组GPX4、谷胱甘肽、枯烯过氧化氢、NADPH、谷胱甘肽还原酶以及GPX4测定缓冲液，可供100次反应使用。

GPX4活性是通过间接方法测量的。 GPX4通过还原过氧化氢（ROOH）将还原型谷胱甘肽（GSH）转化为氧化型谷胱甘肽（GSSG）。随后，在NADPH存在的情况下，谷胱甘肽还原酶（GR）将GSSG还原为其还原形式，并将NADPH转化为NADP?。NADPH本身具有荧光特性，而在氧化为NADP?时会失去这种特性。观察到的荧光减少（激发波长=340 nm；发射波长=450 nm）与可供GR转化的GSSG量以及GPX4活性成正比。

艾美捷BPS Bioscience-GPX4荧光检测试剂盒：

货号：82165

靶标：GPX4

储存/稳定性：当按照指示储存时，该测定试剂盒在收到之日起6个月内表现最佳。

应用：用于研究酶动力学，并在药物发现和高通量筛选（HTS）应用中筛选小分子抑制剂。

运输温度：-80°C

禁忌：测定中DMSO的最终浓度不应超过1%。

警告：避免冻融循环。

科学分类：癌症治疗靶点

所需材料但未提供：

50% 乙醇

能够在λ=340 nm激发并在λ=450 nm检测发射光的微孔板荧光光度计

可调节微量移液器及无菌吸头

仅供研究使用   

检测结果示例：

图：氯化汞（II）对GPX4活性的抑制作用。 在氯化汞（II）（Sigma #215465）的不同浓度存在下测量GPX4活性。“空白”值从所有其他值中减去。结果以对照组的百分比表示（无抑制剂时的活性，设定为100%）。

文献参考：

Zhang X., et al., 2020 J Cell Physiol 235 (4):3425-3437.

Lee J. and Roh J.-L., 2023 Cancer Letters 559: 216119.