热休克蛋白90 kDa(HSP90)是热休克蛋白家族的成员。 HSP蛋白是分子伴侣蛋白,参与帮助蛋白质正确折叠并抵抗热应激,通过作用于激素受体和激酶参与细胞信号传导,参与细胞骨架组织、细胞周期和分化(通过作用于CDK4(细胞周期依赖性激酶4)、Wee1和CDK11p110等)。HSP90有3个家族成员,它们在细胞定位上有所不同。HSP90A是细胞质蛋白,有两个可诱导的亚型(HSP90α1和α2)和一个组成性表达的亚型(HSP90β)。HSP90B(内质网蛋白)存在于内质网中,而TRAP(TNF受体相关蛋白1)存在于线粒体中。它们由四个结构域组成:N端结构域(NTD)、连接区、中间结构域(MD)和C端结构域(CTD)。NTD具有高亲和力的ATP结合位点,而CTD主要参与靶标结合、二聚化和定位。HSP90β在转录水平上受到调控,通过翻译后修饰(如磷酸化)和分子辅助伴侣进行调节。HSP90通过参与多种癌基因以及在血管生成、炎症、肿瘤抑制和转移中起作用的蛋白的稳定化,促进癌症进展。因此,HSP90已成为癌症治疗的有吸引力的靶点。除了癌症,HSP90还在阿尔茨海默病、帕金森病和病毒感染中发挥作用。从其多种和关键功能来看,开发针对HSP90的抑制剂对于治疗多种严重且致命的疾病是有益的。
HSP90β(N端结构域)测定试剂盒是一种荧光偏振(FP)均质96孔板试剂盒,专为筛选和鉴定HSP90β(热休克蛋白90 kDa beta)抑制剂而设计。 该测定利用了荧光标记的加丹霉素。试剂盒包含足够的纯化重组HSP90β、荧光探针和测定缓冲液,可供100次反应使用。
该测定需要一台能够测量荧光偏振(FP)并配备读取FP信号所需部件的荧光微孔板读取器。
艾美捷BPS Bioscience-HSP90βN端结构域检测试剂盒:
货号:50294
同义词:HSP90b、热休克蛋白90b、HSP90beta、HSP90β
试剂盒格式:荧光偏振
物种:人
提供方式:HSP90β N端结构域测定试剂盒采用便捷的96孔板格式,包含足够的纯化HSP90β酶、FITC标记的加丹霉素以及HSP90β测定缓冲液,可供100次酶反应使用。
所需材料但未提供
40 mM DTT
2 mg/ml牛血清白蛋白(BSA)
可调节微量移液器及无菌吸头
旋转或摇动平台
能够测量荧光偏振的荧光微孔板读取器(λex=470(5 nm带宽)和在λem=528(10 nm带宽)处检测)
靶标:HSP90b
储存/稳定性:当按照指示储存时,该测定试剂盒在收到之日起6个月内表现最佳。
应用:用于研究酶动力学,并在药物发现和高通量筛选(HTS)应用中筛选小分子抑制剂。
运输温度:-80°C
注意:截至2025年4月,该操作步骤已重新优化以提高性能。
仅供研究使用
检测结果示例:
图:加丹霉素对HSP90β与其配体结合的抑制作用。
在加丹霉素(#27008)的不同浓度存在下,评估了HSP90β与FITC标记的加丹霉素的结合情况。使用Bio-Tek荧光微孔板读取器测量荧光。结果以活性百分比表示,其中在没有抑制剂的情况下,结合活性被设定为100%。
文献参考:
Allan R.K., et al., 2006 J. Biol. Chem. 281(11): 7161-71.
Hoter A., et al., 2018 Int J Mol Sci. 19(9):2560.
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