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重组小鼠LTBR-Fc融合蛋白:TNFR超家族研究的高纯度工具

发布者:艾美捷科技    发布时间:2026-08-21     
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在免疫调控与炎症疾病研究中,淋巴毒素β受体(LTBR)作为TNFR超家族的重要成员,参与淋巴细胞调控、凋亡及三级淋巴结构形成等多种病理生理过程。针对LTBR信号通路的功能研究及抗体药物开发需求,由艾美捷代理BPS Bioscience推出的重组小鼠LTBR-Fc融合蛋白(HiP?高纯度级)(货号:71122)以其严格的纯度标准、低内毒素水平和完整的受体胞外区结构,为蛋白相互作用分析及免疫研究提供了性能可靠的实验工具。

 

分子设计与融合策略

该蛋白涵盖小鼠LTBR第28至221位氨基酸残基,即全长胞外结构域,C端融合人IgG1 Fc片段。Fc标签的引入兼具双重功能:其一,可通过Protein A/G亲和层析实现一步纯化;其二,Fc片段赋予蛋白较长的体外半衰期和更好的溶解稳定性,适用于长时间孵育类实验。融合蛋白经HEK293哺乳动物细胞表达系统制备,该系统可确保正确的糖基化修饰——SDS-PAGE中该蛋白因糖基化修饰表现为高于理论分子量49 kDa的表观条带,属于正常现象,不影响其生物活性。

 

HiP 高纯度标准:≥90%纯度与低聚集体控制

该产品归属HiP?高纯度蛋白系列,其核心质控指标包括:经凝胶过滤层析测定纯度≥90%,且聚集体含量低于10%。这一标准显著优于常规亲和纯化产品,对于需要精准定量或高信噪比检测的应用场景尤为关键——高聚集体含量可能导致非特异性结合、批间差异增大或免疫应答偏差,而HiP级别有效排除了上述干扰因素。此外,内毒素水平严格控制在<1 EU/mg,满足细胞水平功能实验对 endotoxin 敏感性的要求,可直接用于原代细胞或免疫细胞刺激实验。

 

缓冲体系与储存要点

蛋白以PBS缓冲液配制(10 mM磷酸盐、138 mM NaCl、2.7 mM KCl, pH 7.4),该生理兼容配方可直接用于大多数结合实验而无需更换缓冲液。产品须于-80°C长期保存,效期至少6个月。使用前冰上解冻并轻柔混匀——严禁涡旋振荡以防蛋白聚集;开管前快速离心收集管壁液滴。建议分装为单次使用小份,液氮速冻后长期保存,避免反复冻融。

 

生理功能与疾病关联

LTBR在髓系来源细胞中高表达,是淋巴毒素(Lymphotoxin)、Diablo及TRAF3的功能性受体。配体结合后,LTBR启动下游NF-κB和PI3K/Akt信号通路,调控淋巴细胞稳态、凋亡及异位淋巴组织新生。在慢性阻塞性肺疾病患者中,肺上皮细胞LTBR配体及靶基因表达水平显著上调,提示LTBR信号异常活化在COPD气道炎症中发挥重要驱动作用。因此,该受体已成为炎症性疾病和免疫治疗领域的关注靶点。

 

核心应用场景

蛋白-蛋白相互作用分析:利用Fc标签的稳定二聚化特性,通过表面等离子共振或生物层干涉技术测定LTBR与淋巴毒素α/β异三聚体、TRAIL等天然配体或候选抗体药物的结合亲和力及动力学参数。

中和抗体筛选与表位鉴定:在ELISA或细胞阻断实验中,使用该蛋白作为靶标抗原,评估抗体对LTBR-配体结合的抑制效果,绘制竞争结合曲线。

细胞水平功能验证:将重组LTBR-Fc蛋白加入淋巴细胞或上皮细胞培养体系,竞争性阻断内源LTBR与配体的相互作用,观察下游信号磷酸化水平及细胞凋亡率的变化。

SDS-PAGE质控对照:该蛋白可直接作为分子量标记对照品,用于检测LTBR相关免疫沉淀产物的目标条带位置。

 

总之,重组小鼠LTBR-Fc融合蛋白以HEK293来源的正确折叠修饰、HiP级高纯度标准及<1 EU/mg低内毒素水平为核心品质保障,为LTBR信号机制研究及免疫疗法开发提供了一款兼具可靠性、稳定性和应用广度的实验工具。

 

文献参考:

Crowe P.D., et al., 1994 Science. 264(5159):707-10.

Wu M.Y., et al., 1999 J Biol Chem. 274(17):11868-73



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