重组人SARM1蛋白：神经退行性疾病研究的NADase活性工具

在神经损伤与退行性疾病研究领域，轴突变性作为神经元损伤的关键病理事件，其分子机制的解析对于开发神经保护策略具有重要意义。SARM1（含无菌α和TIR基序蛋白1）作为NAD?代谢的关键调控酶，在轴突变性进程中扮演核心驱动角色。由艾美捷代理BPS Bioscience推出的重组人SARM1蛋白（FLAG标签）（货号：100069）涵盖全长功能域，经HEK293哺乳动物表达系统制备并亲和纯化，为酶动力学研究、抑制剂筛选及信号通路解析提供了高活性的工具蛋白。

分子结构与功能域设计

SARM1是Toll/白细胞介素受体家族中唯一具有跨膜结构域且定位于线粒体的成员。该蛋白构建体覆盖人SARM1第28至724位氨基酸残基（全长末端），分子量约77 kDa，N端携带FLAG标签便于免疫检测与亲和纯化。该设计保留了完整的TIR结构域——该结构域是SARM1催化活性的核心元件，具有NAD?水解酶活性，可将NAD?裂解为ADP核糖（ADPR）、环状ADPR和烟酰胺。

表达系统与纯化工艺

该蛋白采用HEK293哺乳动物细胞表达系统进行重组生产。相较于原核表达系统，HEK293系统具备完备的翻译后修饰能力，可确保蛋白的正确折叠与构象完整性，避免因折叠异常导致的活性丧失或非特异性聚集。亲和纯化工艺采用FLAG标签特异性结合介质，一步纯化即可达到≥90%纯度，满足大多数生化分析对蛋白纯度的要求。

生理功能与疾病关联

在健康神经元中，SARM1通过下游效应分子NMNAT2维持低活性状态。当轴突受损时，NMNAT2水平下降，SARM1被激活，通过其NADase活性耗竭轴突内NAD?库，触发Wallerian变性退行通路——这一名称源于其在外周神经损伤后远端轴突有序降解的经典病理特征。

该蛋白的病理意义在多个层面得到验证：在肌萎缩侧索硬化症中已观察到SARM1基因突变导致NADase组成型激活，加速运动神经元退化；相反，在脑损伤或药物诱导的神经元损伤模型中，SARM1缺失可显著保护轴突完整性。因此，SARM1 NADase活性已成为神经保护药物开发的热门靶点。

缓冲体系与储存要点

蛋白以水相缓冲液形式提供（40 mM Tris-HCl pH 8.0, 110 mM NaCl, 2.2 mM KCl, 20%甘油, 3 mM DTT，含可变浓度FLAG竞争肽），该配方兼顾了蛋白稳定性与酶活性维持——甘油作为冷冻保护剂，DTT维持还原环境以防止半胱氨酸残基氧化。建议收货后分装并于-80°C长期保存，避免反复冻融。FLAG竞争肽的存在可有效防止蛋白聚集，但在使用前需根据实验设计评估是否需要通过脱盐步骤移除，以免干扰后续检测体系。

核心应用场景

酶活性测定与动力学分析：该蛋白可作为SARM1 NADase活性的阳性对照品，用于建立基于荧光或HPLC的NAD?消耗率检测体系，测定K_m和k_cat等酶动力学参数。

抑制剂筛选与药效评估：在ADPR生成量或NAD?剩余量的读数体系中，使用该蛋白进行小分子化合物文库或天然产物提取物的高通量筛选，评估候选抑制剂对SARM1活性的半抑制浓度及抑制模式。

蛋白-蛋白相互作用研究：利用FLAG标签进行免疫共沉淀实验，联合下游质谱或免疫印迹技术，鉴定SARM1与线粒体蛋白、信号转导分子之间的互作网络。

细胞水平功能验证：将重组蛋白通过显微注射或电穿孔导入神经元样细胞系，观察外源SARM1过表达对轴突形态和NAD?代谢的影响，为机制研究提供直接证据。

在信号通路研究中，该蛋白同样适用于构建体外NAD?代谢模型，用于探究SARM1与NMNAT2、PARPs等NAD?相关酶类之间的代谢竞争关系，以及ADPR/cADPR作为第二信使的下游信号传导机制。

该重组人SARM1蛋白以全长功能域设计、哺乳动物细胞表达和≥90%纯度为品质保障，为神经科学、药物发现及NAD?代谢研究领域提供了兼具活性与稳定性的可靠工具。