本品为艾美捷代理Jackson推出的Alexa Fluor 647标记的AffiniPure-VHH?片段羊驼抗兔IgG(H+L)抗体,货号611-604-215,RRID为AB_2922867。宿主为羊驼,靶向兔IgG,抗体形式为VHH片段,偶联Alexa Fluor? 647荧光染料,属于AffiniPure-VHH?二级抗体系列。产品经ELISA和/或固相吸附验证,对牛、人、小鼠血清蛋白具有最小交叉反应。本品仅限体外研究使用,非医疗器械,不得用于诊断或治疗用途。
一、反应特异性与交叉反应控制
经免疫电泳和/或ELISA验证,该抗体可与兔IgG完整分子反应,同时识别其他兔免疫球蛋白的轻链。抗体经ELISA和/或固相吸附测试,确保与牛、人、小鼠血清蛋白的交叉反应最小化,但仍可能与其他物种的免疫球蛋白发生交叉反应。这种经过交叉吸附处理的特性使其特别适合多重标记实验,可有效降低非特异背景。
二、VHH片段的结构优势
AffiniPure-VHH二级抗体是源自超免疫羊驼的多克隆单域抗体(纳米抗体)。VHH片段小于15 kDa,体积仅为传统全IgG抗体的约十分之一,组织穿透性优异,非常适合对穿透性要求较高的成像实验。同时,其交叉吸附设计保证了对目标物种的高度特异性,适用于多重标记检测。
三、Alexa Fluor? 647偶联物特性
Alexa Fluor? 647最大吸收波长约651 nm,最大发射波长约667 nm,在水性封片介质中亮度优于Cy5和DyLight 650。该波长适用于流式细胞术,也是共聚焦显微镜多重标记检测中远红发射染料的优选。其显著优势在于生物样本在该光谱区域自发荧光低,可有效提高信噪比。但需注意,由于其发射峰位于667 nm,肉眼观察效果不佳,且无法用汞灯最佳激发,因此不推荐用于常规落射荧光显微镜,最常配合配备合适激光器和远红检测器的共聚焦显微镜使用。此外,Alexa Fluor 647偶联物是流式细胞术中别藻蓝蛋白(APC)偶联物的低成本替代选择。
四、物理状态与储存复水
产品以冻干固体形式提供,应于2-8°C储存。复水时按产品规格书指定体积加入去离子水,若溶液不澄清需离心。工作稀释液须当日配制,未稀释液体在2-8°C可稳定约6周。复水后长期保存应分装并于-70°C或更低温度冻存,避免反复冻融;亦可加入等体积ACS级或更优甘油至终浓度50%,于-20°C以液体形式保存。复水后有效期一年,若测试结果满足预期用途可适当延长。
五、纯度、缓冲液与建议工作浓度
抗体经偶联抗原的琼脂糖珠免疫亲和层析纯化,并已去除Fc片段和全IgG分子。缓冲液为0.01M磷酸钠、0.25M氯化钠,pH 7.6;含15 mg/ml无IgG、无蛋白酶牛血清白蛋白作为稳定剂,以及0.05%叠氮钠作为防腐剂。大多数应用的建议稀释范围为1:200-1:800。由于最佳稀释度受抗原密度、通透性等多种因素影响,实际稀释度需经实验确定。
六、文献参考
Automated Cyclic Super-Resolution Microscopy for Nanoscale Protein Mapping
Preprint on BioRxiv : the Preprint Server for Biology on 17 March 2026 by Ma, H., Zhang, C., et al.
Nanobody-Based Bioconjugates as Potent and Broadly Active Inhibitors of HIV Entry.
In Journal of the American Chemical Society on 11 February 2026 by Saha, S. J., Kumariya, R., et al.
Alterations of the skeletal muscle nuclear proteome after acute exercise reveals a posttranscriptional influence.
In American Journal of Physiology - Cell Physiology on 1 September 2025 by Martin, R. A., Zhang, X., et al.

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