本品为艾美捷代理Jackson推出的辣根过氧化物酶(HRP)标记的AffiniPure 山羊抗羊驼IgG(H+L)抗体,货号128-035-160,RRID为AB_2783751。宿主为山羊,靶向羊驼IgG,抗体形式为全IgG,多克隆来源,属于抗羊驼二级抗体系列。产品经ELISA和/或固相吸附验证,对牛、人、小鼠、兔、大鼠血清蛋白具有最小交叉反应,适用于羊驼及美洲驼来源抗体的免疫检测。
一、反应特异性与使用限制
经免疫电泳和/或ELISA验证,该抗体可与羊驼IgG完整分子反应,同时与美洲驼(llama)IgG反应。需特别注意的是,该抗体主要识别IgG的Fc区,因此不推荐用于VHH抗体的检测。抗体不与非免疫球蛋白血清蛋白结合,并已通过ELISA和/或固相吸附测试,确保与牛、人、小鼠、兔、大鼠血清蛋白的交叉反应最小化,但仍可能与其他物种的免疫球蛋白发生交叉反应。
二、抗体形式与特点
全IgG抗体通过免疫亲和层析从抗血清中分离获得,为保留完整结构的分子,具有Fc段及两个由二硫键连接的抗原结合Fab段,呈二价结构,平均分子量约160 kDa。全IgG形式适用于大多数免疫检测流程,且成本效益较高。
三、HRP偶联物特性
HRP偶联物采用改良Nakane与Kawaoi法(J. Histochem. Cytochem. 1974. 22, 1084)制备。过氧化物酶偶联物常用于免疫组化、Western blotting和ELISA。对于哺乳动物细胞免疫染色,使用抗HRP抗体可降低背景,因该抗体不识别细胞內源性过氧化物酶样酶;亲和纯化的抗HRP抗体及偶联物亦可用于HRP抗原检测或含HRP试剂的信号放大。
四、物理状态与储存复水
产品以冻干固体形式提供,应于2-8°C储存。复水时按产品规格书指定体积加入去离子水,若溶液不澄清需离心。工作稀释液须当日配制,未稀释液体在2-8°C可稳定约6周。复水后长期保存应分装并于-70°C或更低温度冻存,避免反复冻融;亦可加入等体积ACS级或更优甘油至终浓度50%,于-20°C以液体形式保存。复水后有效期一年,若测试结果满足预期用途可适当延长。
五、纯度、缓冲液与建议工作浓度
抗体经偶联抗原的琼脂糖珠免疫亲和层析纯化。缓冲液为0.01M磷酸钠、0.25M氯化钠,pH 7.6;含15 mg/ml无IgG、无蛋白酶牛血清白蛋白作为稳定剂,不含防腐剂。需特别注意,使用叠氮钠作为防腐剂会显著抑制辣根过氧化物酶的酶活性。建议工作浓度范围为:免疫组化/细胞化学1:500-1:5,000;ELISA及显色底物Western blotting 1:5,000-1:100,000;ECL底物Western blotting 1:10,000-1:200,000。由于最佳稀释度受抗原密度、通透性等多种因素影响,实际稀释度需经实验确定。

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