PDE4C1检测试剂盒是一种荧光偏振(FP)均相96孔板试剂盒,专为筛选和鉴定PDE4C1(磷酸二酯酶4C1)抑制剂而设计。该试剂盒利用了一种特定的荧光磷酸盐结合纳米颗粒。试剂盒包含足够用于100次反应的纯化重组PDE4C1、荧光探针、PDE检测缓冲液、结合剂和稀释液。
检测使用了标记有荧光素的环状腺苷酸单磷酸(cAMP-FAM用于PDE4C1),其中磷酸基团嵌入在环状核苷酸中。这是一种非常小的分子,旋转速度快(FP值低)。PDE4C1催化环状核苷酸中磷酸二酯键的水解,释放出磷酸基团。在第二步中,自由的磷酸基团被一种特定的磷酸盐结合纳米珠(结合剂)识别,形成一个大复合物,其运动受到限制(FP值高)。FP值与PDE4C1活性成正比。
艾美捷BPS Bioscience-PDE4C检测试剂盒:
货号:60384
试剂盒格式:荧光偏振
物种:人类
产品形式:PDE4C1抑制剂筛选试剂盒提供96孔或384孔的便捷格式,包含纯化的PDE4C1酶、荧光标记的PDE4C1底物(cAMP)、结合剂以及用于100次或400次酶反应的PDE检测缓冲液。
储存/稳定性:如果按照说明储存,该试剂盒在收到之日起6个月内可达到最佳性能。
应用范围:适用于研究酶动力学以及在药物发现和高通量筛选(HTS)应用中筛选小分子抑制剂。
运输温度:-80°C(干冰)
科学分类:磷酸二酯酶
仅限研究使用
注意事项
所需材料但未提供
-可调节微量移液器及无菌吸头
-旋转或摇动平台
-能够测量荧光偏振的荧光微孔板读取仪(λex=470nm(5nm带宽)和在λem=528nm(10nm带宽)处检测)
检测结果示例:
图:PDE4C1与不同浓度的罗氟司特(#27645)在200nMFAM-环状-3',5'-AMP底物存在下孵育。使用TecanM1000荧光微孔板读取仪测量荧光偏振。结果以活性百分比表示,其中无抑制剂(阳性对照)时的FP值设为100%。
文献参考:
Ahmed W., et al., 2021 Biomedicine & Pharmacotherapy 134:111128.
Huang W., et al., 2020 Nat Commun 11:3191.
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