PDE4AIsoform4检测试剂盒是一种荧光偏振(FP)均相96孔板检测试剂盒,专为筛选和鉴定PDE4AIsoform4(磷酸二酯酶4AIsoform4)抑制剂而设计。该检测利用了一种特异性的荧光磷酸盐结合纳米颗粒。试剂盒包含足够用于100次反应的纯化重组PDE4AIsoform4、荧光探针、PDE检测缓冲液、结合剂和稀释液。
检测中使用了带有荧光素标记的环磷酸腺苷(cAMP-FAM,用于PDE4A),其中磷酸基团嵌入在环核苷酸中。这是一个非常小的分子,旋转速度快(荧光偏振值低)。PDE4AIsoform4催化环核苷酸中磷酸二酯键的水解,释放出磷酸基团。在第二步中,自由的磷酸基团被一种特异性的磷酸盐结合纳米珠(结合剂)识别,形成一个大复合物,其运动受限(荧光偏振值高)。荧光偏振值与PDE4AIsoform4的活性成正比。
艾美捷BPS Bioscience-PDE4A1A检测试剂盒:
货号:60340
同义词:抑制剂筛选、检测试剂盒、PDE4A、PDE4-A1A、PDE
试剂盒格式:荧光偏振
物种:人
所需材料(但未提供):
-可调节微量移液器及无菌吸头
-旋转或摇动平台
-能够测量荧光偏振的荧光微孔板读取器(激发波长λex=470nm,带宽5nm;发射波长λem=528nm,带宽10nm)
靶点:PDE4AIsoformA
储存/稳定性:按照说明储存时,该试剂盒在收到之日起6个月内表现最佳。
应用:用于研究酶动力学以及在高通量筛选(HTS)应用中筛选小分子抑制剂以发现药物。
运输温度:-80°C
仅限研究使用
禁忌事项:
-检测中DMSO的最终浓度不应超过1%。
-荧光化合物可能会根据其光谱激发和发射特性干扰结果。
-建议单独测试化合物以确定其对检测结果的潜在干扰。
检测结果示例:
图:PDE4A在200nMFAM-Cyclic-3',5'-AMP底物存在下与Roflumilast的不同浓度共同孵育。使用TecanM1000荧光微孔板读取器测量荧光偏振。结果以活性百分比表示,其中在没有抑制剂(阳性对照)的情况下,FP值设为100%。
文献参考:
Ahmed W., et al., 2021 Biomedicine & Pharmacotherapy 134:111128.
Huang W., et al., 2020 Nat Commun 11:3191.
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