小鼠抗dsDNA IgM ELISA试剂盒是一种免疫测定试剂盒适用于定量或滴定特异性IgM抗体活性血清或血浆中的双链DNA。其他生物液体,包括可以验证组织培养基的使用。用于体外仅供研究使用(RUO),不用于治疗或诊断。
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小鼠抗 dsDNA IgM 特异性 ELISA 试剂盒,96 次检测,定量 | ADI-5130 | 查看 |
小鼠抗 dsDNA IgM 特异性 ELISA 试剂盒,96 次检测,定量检测原理:
小鼠抗双链DNA IgM ELISA试剂盒基于样品中小鼠抗双链DNA IgM与微孔板上固定的双链DNA的结合,并通过与辣根过氧化物酶(HRP)酶结合的抗小鼠IgM特异性抗体来检测抗双链DNA IgM抗体。经过洗涤步骤后,加入显色底物(TMB),并通过HRP在底物上的酶反应产生颜色,其与样品中存在的抗双链DNA IgM的量直接成比例。加入停止液以终止反应,然后使用ELISA微孔板读取器测量450nm处的吸光度。样品中小鼠IgM抗体的活性是相对于抗DNA校准品来计算的。
特异性
使用纯化的双链DNA涂覆微孔板;因此,该检测特异性针对双链DNA的抗体。抗小鼠IgM HRP结合物特别与板上与双链DNA结合的小鼠IgM类抗体反应。IgA、IgG和IgE抗体不会超过背景信号被测量。
检测灵敏度
双链DNA涂层水平、HRP结合物浓度和低非特异性结合(NSB)样品稀释液优化,以区分1:100稀释的小鼠血清样品中的抗双链DNA IgM与背景(非抗体)信号。
校准品值
校准品是对双链DNA有反应的抗体稀释液。值被赋予为任意的抗DNA活性单位(见检测限制)。
检测设计和设置
低非特异性结合(NSB)样品稀释液,TBTm,比1xSD20T稀释液更能降低NSB,而不会减少真实的阳性抗体信号,从而提供更大的阳性与非免疫样品之间的区分度。
样品收集和处理
培养基、血清和其他生物流体可以作为样品使用,适当的稀释以避免溶液基质干扰。对于血清,通过静脉采血,允许凝血,并通过室温离心分离血清。对于其他样品,包括组织培养介质,在稀释到样品稀释液之前,通过离心和/或过滤澄清样品。
抗体稳定性
建议将血清稀释到工作样品稀释液(WSD)中以稳定抗体活性。这增强了可重复的采样,并稳定了抗体活性多年,冷藏或冷冻储存。进一步稀释到提供最低检测背景的低NSB样品稀释液(LNSD)中,应该是初始稀释的至少10倍,并在检测当天进行。
示例:初始(1/5):10微升血清 + 40微升WSD [或0.1毫升 + 0.4毫升]
进一步(1/50):10微升初始(1/5)+ 90微升LNSD(1/50)
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