重组人PI3激酶p110α(H1047R)/p85α复合物，助力靶向抗癌抑制剂高通量筛选

产品概述

由艾美捷代理BPS Biosciences推出的重组人I类磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）异源二聚体复合物（FLAG标签）（货号：40641），由催化亚基p110α（PIK3CA）与调节亚基p85α（PIK3R1）组成，是研究PI3K/AKT/mTOR信号通路、进行抑制剂筛选及选择性分析的关键工具酶。

分子结构与序列设计

催化亚基p110α (H1047R)：涵盖人p110α第2至1068位氨基酸（全长），其N端携带FLAG标签，便于检测与免疫沉淀。该亚基引入了临床上重要的激活突变H1047R，该突变常见于多种癌症，可使激酶活性持续升高。

调节亚基p85α：涵盖人p85α第1至724位氨基酸（全长），无任何融合标签，以保持其天然构象和调节功能。

两个亚基在Sf9昆虫细胞中共表达，通过亲和纯化获得稳定、有活性的胞内复合物，分子量分别为125 kDa（p110α）和84 kDa（p85α）。

生化特性与质量控制

纯度：经SDS-PAGE鉴定，产品纯度≥80%，满足大多数体外生化实验需求。

缓冲体系：产品提供于含25 mM Tris-HCl (pH 8.0)、69 mM NaCl、1.35 mM KCl、0.025% Tween-20、3 mM DTT及50%甘油的保护性水溶液中，该配方在保障酶稳定性的同时，兼容多种下游实验体系。

储存稳定性：在-80°C条件下，本品可稳定保存至少6个月。建议分装保存，避免反复冻融，使用时冰上融化并轻轻混匀，切勿涡旋振荡。

酶学活性验证

本产品的酶活性已通过ADP-Glo发光法严格验证。标准验证条件如下：

反应体系：40 mM Tris-HCl (pH 7.5)、10 mM MgCl?、100 μM ATP、200 uM PI3K底物（BPS Bioscience #40560）。

反应条件：30°C孵育18分钟。

检测方法：通过检测ATP向ADP的转化量来定量激酶活性。

在此条件下，该复合物的比活性为1,770 pmol/min/ug，确保了其在酶动力学研究中的高灵敏度与可靠性。

背景与应用价值

p110α催化亚基与p85α调节亚基共同构成I类IA型PI3K，该激酶通过将PIP2转化为PIP3，激活下游AKT等效应分子，深度参与细胞增殖、存活与代谢调控。p110α的H1047R突变是多种实体瘤（如乳腺癌、结直肠癌）中的高频驱动突变，使其成为抗癌药物研发的重要靶点。

本品可直接用于：

1.  酶动力学研究：测定突变型PI3K的Km、Vmax等参数。

2.  抑制剂筛选：评估小分子化合物、抗体或降解靶向嵌合体（PROTAC）对突变型PI3K的抑制活性。

3.  选择性谱分析：对比不同PI3K亚型或突变体对抑制剂响应差异，助力开发高选择性、低毒性的下一代抗肿瘤药物。

操作注意事项

解冻与取样：冰上解冻，使用前轻轻混匀并短暂离心，确保溶液均一。

分装保存：建议按单次用量分装后液氮速冻，长期保存于-80°C。

应用范围：本品仅供研究用途（Research Use Only），不可用于临床诊断或治疗。