AptaFluor SAH甲基转移酶检测试剂盒：直接检测SAH，适用几乎任何甲基转移酶

产品概述

由艾美捷代理BellBrook推出的AptaFluor SAH甲基转移酶检测试剂盒（货号：3023-10K）是一款用于甲基转移酶筛选与先导化合物发现的简单混合即读型检测工具。该试剂盒直接检测甲基转移酶在甲基化过程中生成的SAH（S-腺苷同型半胱氨酸），适用于几乎任何甲基转移酶。甲基转移酶以S-腺苷-L-甲硫氨酸（SAM）为甲基供体对多种底物进行甲基化，并共同生成SAH。AptaFluor克服了现有检测方法无法检测低转化率或对SAM具有高亲和力的酶的问题。该检测专为高通量筛选设计，采用简便易用的混合即读格式。试剂盒提供检测所需的全部试剂，但不包含酶；该检测设计用于纯化酶制剂，未经细胞裂解液、血液、血清或其他生物样品验证。

检测原理

AptaFluor检测通过直接测量多种底物甲基化过程中生成的SAH来测定酶活性。由于以通用、均相的形式直接检测SAH，因此可对RNA、DNA和组蛋白甲基转移酶进行高通量筛选。该技术利用天然存在的适配体（即核糖开关）选择性结合SAH，其出色的亲和力与选择性使甲基转移酶的筛选和 profiling 具有无与伦比的灵敏度。该检测提供TR-FRET读数，采用简单的混合即读格式——进行酶反应、加入检测试剂、测量信号即可，系统操作简便、结果稳健，非常适合高通量筛选。

核心优势

该试剂盒直接检测SAH，适用于几乎任何甲基转移酶；在初始速度条件（SAM向SAH转化率≤20%）下具有稳健检测能力；对缓慢甲基转移酶具有超灵敏特性，可适应低至100 nM、高至5 μM的SAM浓度；远红外示踪剂进一步减少荧光化合物和光散射的干扰。

所需材料

使用该试剂盒需自备：甲基转移酶（检测设计用于纯化酶制剂，污染酶可能产生背景信号并降低检测窗口）；酶缓冲液组分（包括酶、缓冲液、受体底物、MgCl?或MnCl?、EGTA、Brij-35及测试化合物）；检测板（需TR-FRET专用全白非结合表面板，建议使用Corning 384孔板#4513或1536孔板#3729，可单独购买）；微孔板读数仪（需配置TR-FRET检测功能）；液体处理设备（需能准确分液最小0.5 ?L至384孔板）；超纯水（部分去离子水系统受核酸酶污染，可降解核苷酸底物、RNA适配体和产物，使用超纯水可消除此问题）。

甲基转移酶检测服务

如希望推进项目但不愿将检测引入内部，BellBrook科学家可凭借丰富的生物化学与酶学专业知识提供支持，加速甲基转移酶项目进程。先导化合物发现服务包括：抑制剂筛选（识别或确认靶点活性）；抑制剂效力分析（针对靶点及/或相关蛋白的剂量反应，快速获得IC50结果）；停留时间测定（采用“跳跃稀释”酶学方法测定koff）；作用机制研究（通过动力学分析确定抑制模式）。