血管紧张素原的检测在以下研究领域具有重要价值:原发性醛固酮增多症、新型肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)抑制剂的研究,以及心血管和肾脏血管疾病的研究。
近年来,由严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)引起的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)与RAAS系统(包括ACE抑制剂和血管紧张素受体拮抗剂ARBs)之间的关系,已成为全球研究的热点。
本试剂盒可定量检测小鼠血清和血浆样本中的完整型血管紧张素原(Full Length Angiotensinogen)。
艾美捷IBL-小鼠完整血管紧张素原检测试剂盒:
货号:27105-96Well
预期用途:研究用试剂
检测方法:酶联免疫吸附试验(ELISA)
标记物:辣根过氧化物酶(HRP)
适用物种:小鼠
检测样本类型:血清、EDTA血浆
(※ 根据样本类型,可能需要额外添加EIA缓冲液。EIA缓冲液需另行购买,详情请参考说明书。)
检测范围:0.16 - 10 ng/mL
第一步反应条件:2 - 8 ℃ 孵育过夜
第二步反应条件:2 - 8 ℃ 孵育60分钟
灵敏度:0.01 ng/mL
特异性:可特异性检测小鼠血清和EDTA血浆中的完整型血管紧张素原(intact Angiotensinogen)。
储存条件:2 - 8 ℃
包装规格:96孔板 × 1
备注1:根据样本类型,可能需要额外添加EIA缓冲液。EIA缓冲液需另行购买。请务必使用本产品专用的EIA缓冲液。
备注2:**操作注意事项**
每次反应后请立即使用洗板机进行洗涤,设置等待时间为0秒。
洗涤时间越长,吸光度(O.D.)值可能越低。
试剂盒组成:
1. 预包被板:抗小鼠AGTAI.兔IgG亲和纯化* 96孔 × 1
2. 标记抗体浓缩液:30×.HRP标记抗小鼠AGT405.兔IgG Fab’亲和纯化* 0.4 mL × 1
3. 标准品:重组小鼠完整型血管紧张素原 0.5 mL × 2
4. EIA缓冲液 30 mL × 1
5. 标记抗体稀释液 12 mL × 1
6. 显色底物:TMB溶液 15 mL × 1
7. 终止液 12 mL × 1
8. 洗涤缓冲液浓缩液 50 mL × 1
检测原理:
本试剂盒采用固相夹心酶联免疫吸附法ELISA.。预包被板上固定有捕获抗体,将样本和标准品加入孔中进行第一步反应。反应后,加入HRP标记的检测抗体进行第二步反应。洗涤去除未结合的抗体后,加入四甲基联苯胺TMB.显色底物,显色强度与目标分子的含量成正比。
检测步骤:
1.加入空白对照 确定空白对照孔,每孔加入100 uL的“4号 EIA缓冲液”。
2.加入准备好的样本和标准品 每孔加入100 uL准备好的样本和标准品。
3.盖上板盖,进行孵育第一步反应.。
4.洗涤 使用准备好的洗涤缓冲液洗涤板孔,并彻底去除液体。
5.加入准备好的标记抗体 每孔加入100 uL准备好的标记抗体。
6.盖上板盖,进行孵育第二步反应.。
7.洗涤 使用准备好的洗涤缓冲液彻底洗涤板孔,并完全去除液体。
8.加入“6号 显色底物 - TMB溶液” 每孔加入100 uL TMB溶液。
9.避光孵育。
10.加入“7号 终止液” 每孔加入100 uL终止液。
11.测定吸光度O.D.. 清除板底污垢或水滴,确认孔内液体表面无气泡后,以空白对照为基准,测定标准品和样本的吸光度。
测定波长:450 nm。如使用双波长测定:主波长为450 nm,副波长为600~650 nm。
检测结果计算方法:
1. 以标准品浓度为横轴,吸光度O.D..为纵轴,绘制标准曲线。可使用适当的回归曲线如双对数转换后的二次回归.拟合各点。
2. 根据标准曲线,读取待测样本的吸光度对应的浓度值。
3. 将读取的浓度值乘以样本的稀释倍数,计算最终浓度。
标准曲线示例及实测值:
此处可根据实际实验数据绘制标准曲线并记录样本测定结果.
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