FINO2：非脂氧合酶依赖性脂质过氧化触发剂

产品背景与独特作用定位

FINO2（货号：25096）由艾美捷代理的cayman推出，是一种具有过氧化物结构的铁死亡（ferroptosis）诱导剂，其作用机制在现有铁死亡工具化合物中独具特色。与直接靶向system xc-转运体的Erastin/IKE或直接抑制GPX4的RSL3不同，FINO2通过氧化铁离子间接抑制GPX4，代表了铁死亡诱导策略的另一条路径——利用铁依赖性过氧化物反应触发脂质过氧化。

作用机制：间接GPX4抑制与铁氧化

对GPX4的间接调控

FINO2在体外可降低GPX4的活性和蛋白水平，但不充当GPX4的活性位点抑制剂、变构抑制剂或共价抑制剂，也不改变GPX4的稳态。这意味着FINO2对GPX4的调控是间接的：通过氧化细胞内的铁池，促进内过氧化物部分的降解，进而产生具有反应性的含氧物种，最终导致GPX4被消耗或失活。

铁氧化特性

FINO2直接氧化铁离子，这一过程触发其分子中内过氧化物部分的降解。值得注意的是，该化合物不改变铁调控蛋白（如IRP2、FTL1、TFR）的蛋白水平，表明其作用局限于铁的氧化状态而非整体铁代谢稳态的干扰。这一特点使其在研究铁氧化在铁死亡中的特异性作用时具有独特价值。

脂质过氧化诱导

在HT-1080细胞中，10 ?M的FINO2可诱导脂质组中大部分脂质种类的过氧化。这种广泛脂质过氧化不依赖于花生四烯酸脂氧合酶（ALOX）途径——这与某些依赖ALOX的铁死亡诱导剂形成鲜明对比。该机制提示FINO2可能通过铁催化的Fenton反应直接引发脂质过氧化链式反应，而不需要通过脂氧合酶的酶促催化。

细胞毒性与抗增殖活性

NCI-60细胞系筛选数据

在美国国家癌症研究所（NCI）的60种癌细胞系panel中，FINO2表现出广泛的抗肿瘤活性：

平均半数生长抑制浓度（GI50）：5.8 ?M

平均半数致死浓度（LC50）：46 ?M

GI50与LC50之间的显著差距（约8倍）表明FINO2在抑制细胞生长方面的效力远高于直接杀伤效力，提示其作用可能以抑制增殖为主，而非急性细胞毒性。

选择性细胞毒性

在15–20 ?M浓度范围内，FINO2对癌基因转化的BJ-ELR细胞具有选择性杀伤作用，而对非癌性的BJ-hTERT细胞影响较小。这一特征与Erastin家族化合物的RAS选择性一致，进一步支持了铁死亡诱导剂在肿瘤靶向治疗中的应用潜力。

血液肿瘤细胞中的验证

在RS4;11 B淋巴母细胞白血病细胞中：

6 ?M FINO2即可诱导氧化应激，包括脂质过氧化

诱导铁依赖性细胞死亡，该效应可被铁死亡特异性抑制剂阻断：

Ferrostatin-1（Item No. 17729）

Liproxstatin-1（Item No. 17730）

不诱导凋亡、坏死或自噬的标志物，确认死亡途径为纯铁死亡

这一数据尤为关键，因为它排除了FINO2通过其他细胞死亡方式（如凋亡）发挥作用的可能性，确证了其作为特异性铁死亡诱导剂的工具价值。

化学与物理性质

分子信息：

分子式：C15H28O3

分子量：256.4

纯度：≥95%

物理形态：固体（具体结晶形态未明确）

溶解度（各溶剂体系）：

溶剂体系 | 溶解度

DMF | 30 mg/ml

DMSO | 30 mg/ml

乙醇 | 30 mg/ml

乙醇:PBS (pH 7.2) (1:2) | 0.3 mg/ml

FINO2在DMF、DMSO和乙醇中具有良好且一致的溶解度（均为30 mg/ml），便于制备高浓度储备液。在含PBS的缓冲体系中溶解度较低（0.3 mg/ml），需注意稀释过程中的析出风险。

储存与运输条件

储存温度：-20°C，建议密封避光保存，避免过氧化物降解

运输条件：美国大陆地区使用湿冰运输（与IKE类似），提示该化合物在室温下稳定性有限；其他地区以实际运输条件为准

使用限制

重要警告：本产品仅供科研使用，不适用于人类或兽医用途。

功能性应用建议

基于上述技术参数，推荐以下使用策略：

1. 体外铁死亡诱导浓度范围：

初步筛选：5–20 ?M

细胞生长抑制实验：参考平均GI50 = 5.8 ?M，建议1–30 ?M浓度梯度

脂质过氧化检测：10 ?M（HT-1080细胞）或6 ?M（RS4;11细胞）

2. 选择性实验设计：

推荐配对细胞系：BJ-ELR（癌基因转化）vs BJ-hTERT（永生化非癌）

测试浓度：15–20 ?M，观察选择性杀伤窗口

3. 机制验证：

铁死亡拮抗剂：Ferrostatin-1（1–10 ?M）或Liproxstatin-1（0.1–1 ?M）预处理1–2小时

铁螯合剂：去铁胺（DFO，50–100 ?M）可螯合游离铁，阻断FINO2的效应，进一步确证铁依赖性

与其他铁死亡诱导剂的区别性验证：使用GPX4过表达细胞系——RSL3的效应被GPX4过表达阻断，而FINO2通过氧化铁起作用，可能部分绕过GPX4过表达（需实验验证）

4. 溶剂选择：

储备液（>100 mM）：DMSO或DMF均可（30 mg/ml ≈ 117 mM）

工作液：细胞培养基中DMSO终浓度不超过0.1%–0.5%

缓冲体系配制的注意：若需要PBS缓冲体系，建议使用乙醇:PBS (1:2)配方，溶解度0.3 mg/ml，配制后尽快使用以避免析出

5. 检测指标建议：

GPX4活性测定（需注意FINO2不直接抑制，而是消耗GPX4蛋白）

脂质过氧化：C11-BODIPY 581/591荧光探针，或检测MDA/4-HNE含量

铁氧化状态：可使用FerroOrange等铁离子探针检测亚铁离子水平变化

排除其他死亡方式：建议并行检测caspase-3活化（凋亡）、LC3-II（自噬）、以及HMGB1释放或PI/Annexin V双染（坏死/凋亡区分）

6. 体内应用潜力：

目前产品描述未提供体内药效数据。FINO2作为过氧化物化合物，其体内稳定性、生物利用度和耐受性尚待评估。若需体内实验，建议进行预实验确定最大耐受剂量（MTD）和药代动力学参数。其疏水性（分子量256.4，logP未提供）提示可能具有较好的膜通透性，但过氧化物结构在体内可能被还原代谢。

与其他铁死亡诱导剂的比较优势

特性 | Erastin/IKE | RSL3 | FINO2

直接靶点 | system xc- | GPX4（有上下文依赖性） | 铁（氧化状态）

GPX4抑制机制 | 间接（GSH耗竭） | 直接（构象依赖性） | 间接（蛋白水平降低）

铁依赖性 | 是 | 是 | 是（且直接氧化铁）

ALOX依赖性 | 否 | 部分细胞系依赖 | 不依赖

独特优势 | 体内活性（IKE） | 高纳摩尔级效力 | 作用机制独特，不直接结合GPX4

文献参考：

1. Gaschler, M.M., Andia, A.A., Liu, H., et al. FINO2 initiates ferroptosis through GPX4 inactivation and iron oxidation. Nat. Chem. Biol. 14(5), 507-515 (2018).

2. Abrams, R.P., Carroll, W.L., and Woerpel, K.A. Five-membered ring peroxide selectively initiates ferroptosis in cancer cells. ACS Chem. Biol. 11(5), 1305-1312 (2016).