DNA甲基转移酶(DNA methyltransferase,DNMT)是表观遗传学的核心调控因子,通过催化胞嘧啶C5位甲基化(形成5-mC),沉默基因表达并维持基因组稳定性。其功能分为三类:维持型DNMT(DNMT1) :复制后修复半甲基化DNA,确保甲基化模式遗传;从头合成型DNMT(DNMT3a/3b) :胚胎发育中建立全新甲基化模式,调控细胞分化;特殊成员DNMT2:虽命名相似,实际甲基化tRNA而非DNA,参与RNA调控。DNMT异常表达导致抑癌基因高甲基化(如乳腺癌FOXO3a基因沉默),与癌症、自身免疫病(如系统性硬化症)及代谢疾病密切相关。
DNMT活性及抑制检测的科研与临床价值
检测目标 | 科学意义 | 应用场景 |
活性检测 | 量化DNMT全局功能,反映细胞表观遗传状态 | 疾病机制研究、环境毒素评估 |
抑制检测 | 筛选靶向抑制剂,验证药物表观遗传效力 | 抗癌药物研发(如阿扎胞苷) |
Epigentek的DNMT 活性/抑制性检测试剂盒(货号P-3139) 提供快速、非放射性、高灵敏度的DNMT活性/抑制性检测方案:
技术原理:
DNMT 底物包被于微孔板;
DNMT催化底物甲基化,生成5-mC;
特异性抗5-mC抗体结合甲基化DNA,显色定量酶活。
主流应用场景:
应用领域 | 样本类型 | 检测目标 |
癌症机制研究 | 细胞核提取物 | DNMT1/3活性抑制效应 |
代谢疾病调控 | 免疫沉淀蛋白(如DNMT1) | O-GlcNAc修饰对酶活影响 |
药物高通量筛选 | 重组DNMT酶 | 抑制剂剂量效应 |
病原体研究 | 胃细胞提取物 | H. pylori诱导的DNMT激活 |
高分文献案例:Nature子刊揭示代谢-DNMT调控轴
文献标题:Inhibition of DNMT1 activity via glucose-regulated O-GlcNAcylation alters the epigenome (Nature子刊, 2023)
※研究设计
处理细胞:Hep3B/HepG2细胞暴露于高葡萄糖(25mM)和O-GlcNAc促进剂TMG;
DNMT1分离:免疫沉淀法纯化DNMT1蛋白;
活性检测:采用P-3139试剂盒定量DNMT1酶活。
※关键发现
高葡萄糖/TMG处理显著降低DNMT1活性(降幅>50%);
机制:O-GlcNAc修饰DNMT1的BAH1结构域S878位点,破坏酶功能[7];
临床关联:糖尿病高血糖环境通过表观遗传重编程促进癌症发生。
※Epigentek的DNMT 活性/抑制性检测试剂盒(货号P-3139) 价值
精准定量:直接检测免疫沉淀蛋白活性,排除细胞背景干扰;
高灵敏度:捕获O-GlcNAc修饰导致的细微酶活变化(p<0.01)。
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