DSHB：杂交瘤和单克隆抗体

DSHB于1986年由国家儿童健康与人类发展研究所建立，自1997年起设在爱荷华大学，其使命是作为国际研究界的抗体资源。目标始终不变：为科学进步储存杂交瘤和单克隆抗体。

产品形式说明

上清液（-s）

由杂交瘤细胞条件培养基构成，主要成分为无动物源成分（ADCF）的单克隆抗体生长培养基。杂交瘤培养初期残留的胎牛血清（FBS）浓度低于1.5-2.0%，且未添加牛血清白蛋白（BSA）作为抗体稳定剂。

浓缩液（-c）

通过50kD超滤膜制备，虽非纯化抗体，但免疫球蛋白含量为上清液的10倍。换算关系为：100ul浓缩液≈1ml上清液的抗体量。推荐仅用于需高浓度小体积抗体的实验（如免疫沉淀、显微注射或抗体偶联）。常规免疫染色/印迹实验建议优先选用上清液。

纯化单抗（-y）

供应量有限，具体推荐稀释比例详见网站各抗体页面的提交者注释。产品标签标注抗体浓度，技术资料可从官网下载。

例如：

冻存细胞（-f）

每管1ml冻存液含5×10⁶至1×10⁷个细胞，干冰运输。接收后需立即复苏培养或转入液氮长期保存。

活细胞（-g）

由单支冻存管复苏扩增而来，含2×10⁷至4×10⁷个活细胞。经质检确认生长状态良好后，以T25培养瓶（含65ml培养基）形式运输。收货后需立即转入培养箱继续培养。

关键生物参数说明

FBS残留量：<2%的浓度设计既保留必要生长因子（如胰岛素、转铁蛋白），又最大限度降低动物源成分干扰

超滤标准：50kD截留分子量确保有效富集IgG类抗体（分子量~150kD）

细胞活率保障：冻存细胞采用程序降温（-1℃/min）结合90%FBS+10%DMSO冻存液，活细胞运输时培养基含15%特级胎牛血清（经70项质控检测）

（注：实际应用中建议对浓缩液进行Bradford法蛋白定量验证，活细胞培养时需维持37℃、5%CO₂的恒温恒湿环境）

产品储存建议

最佳储存确保抗体活性随时间保持。对于立即使用，建议在4°C下短期储存长达两周。如需长期保存，应将溶液分装成不小于20ul的体积，在-20°C或-80°C冷冻。小体积的等分液应能提供足够的试剂供短期使用。应避免冻融循环。对于浓缩物或生物反应器产品，可在冷冻前加入等量的甘油（一种冷冻保护剂）。

产品使用建议

每种应用的最佳免疫球蛋白（Ig）浓度因物种和抗体亲和力而异。对于每种产品，最终用户实验室必须针对每种应用优化抗体滴度。使用小鼠 Ig 进行免疫组织化学（IHC）、免疫荧光（IF）和免疫细胞化学（ICC）时，良好的起始浓度为 2 - 5 ug/ml。对于蛋白质印迹（WB），推荐的小鼠 Ig 浓度范围为 0.2 - 0.5 ug/ml。通常，兔抗体具有更高的亲和力，在初始测试时使用的 Ig 浓度要低得多。兔 Ig 的推荐浓度为：0.2 - 0.5 微克/毫升（IF、IHC 和 ICC）和 20 - 50 ng/ml（WB）。