Cal-520荧光染料为高通量检测细胞内钙离子流动提供了荧光分析方案。作为一款新的钙敏感的荧光染料，Cal-520 AM与目前的绿色钙离子指示剂，如Fluo-3 AM and Fluo-4 AM相比，具有更高的信噪比和细胞内留存。进入表达GPCR或者钙离子通道蛋白的细胞在加入Cal-520 AM后，后者由于具有疏水性的AM基团可以轻易穿透活细胞膜。当其进入到细胞质后，酯酶会将其水解为Cal-520留在细胞内，与细胞内钙离子结合后的Cal-520发出强绿色荧光（荧光强度增强100倍）。由于Cal-520的长波段覆盖、高灵敏度和超强激发，再加上很高的信噪比与细胞内留存，使其成为评估GPCR和钙离子通道研究的卓越工具，也可以用于其拮抗剂和抑制剂的筛选。
