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氧化损伤,怎样找出合适的实验应用生物标志物

发布者:艾美捷科技    发布时间:2020-11-25     
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       氧化应激(Oxidative Stress,OS)是机体活性氧成分与抗氧化系统之间平衡失调引起的一系列适应性的反应。干扰细胞正常的氧化还原状态,会制造出过氧化物与自由基导致毒性作用,因此损害细胞的蛋白质、脂类和核酸。发生在人类的氧化压力,被认为是造成亚斯伯格症候群、自闭症、阿兹海默症、帕金森氏症、注意力缺陷过动症、动脉粥样硬化、心脏衰竭及癌症等的成因。然而活性氧也有它的益处,免疫系统可利用活性氧攻击并杀死病原。短期的氧化应激在防止老化上,也提供了重要的步骤,称做毒物兴奋效应。

氧化应激

 

      氧化应激可通过测量活性氧(ROS)来直接评估,或通过过度产生的ROS对脂质,蛋白质和核酸造成的相关损害来间接评估。尽管直接测量ROS是理想的方法,但是与ROS的瞬时特性相比,通常更依赖于间接方法因为生物分子上的损伤标记相对稳定。

 

      为了帮助您确定在实验系统中最适合使用的方法,艾美捷科技作为专业的生命科学领域解决方案供应商,为您推荐Cayman Chemical品牌的氧化损伤相关产品。以下是用于检测最常见的氧化损伤生物标记物的分析技术的分类。

 

 

      ROS:氧气作为正常代谢的一部分被电子还原,导致形成各种ROS,包括过氧化氢(H2O2)和超氧化物(O2•-)。当不受控制的氧化对生物系统造成压力时,会对细胞大分子造成损害。ROS的测定不能识别ROS产生的来源(即正常状态与疾病状态),但是如果实验模型处于压力下,则ROS可能增加并且分子成分改变。

 

产品名称及描述货号指标说明
Hydrogen Peroxide Cell-Based Assay Kit600050细胞外H2O2利用ADHP(灵敏稳定的H2O2探针),并包含过氧化氢酶以检查试验的特异性
Mitochondrial ROS Detection Assay Kit701600线粒体ROS使用线粒体特异性荧光ROS检测试剂在特定条件下测量ROS的产生;包括抗霉素A作为阳性对照
ROS Detection Cell-Based Assay Kit (DHE)601290ROS将氧化还原敏感探针DHE用作O2•-和H2O2的底物;分别包括用于产生和清除ROS的阳性和阴性对照
Xanthine Oxidase Fluorometric Assay Kit10010895XO活性基于多步酶促反应,其中XO氧化次黄嘌呤时产生的H2O2与ADHP反应

 

      RNS:在氧化应激过程中也会产生活性氮(RNS)。由一氧化氮合酶(NOS)和O2•-合成的高含量一氧化氮(NO•)导致过氧亚硝酸盐的形成。NO•本身也与硫醇和铁硫酶反应,而过氧亚硝酸盐与酪氨酸残基反应形成硝基酪氨酸。

 

产品名称及描述货号指标说明
Nitrate/Nitrite Colorimetric Assay Kit780001NO•代谢物将少量添加的NADPH与催化系统结合使用,将用过的NADP+循环回NADPH以避免NADPH干扰Griess试剂的化学性质;对于血浆和尿液等液体的分析非常有效,但不能通过体外NOS分析(添加了过量的NADPH)进行NO2-和NO3-分析
Nitrate/Nitrite Colorimetric Assay Kit (LDH method)760871体外NOS活性和NO•代谢物用于从添加了过量NADPH的体外NOS分析中分析NO2-和NO3-;protocol中包括使用LDH移除多余的NADPH的额外步骤
Nitrate/Nitrite Fluorometric Assay Kit780051NO•代谢物使用DAN代替Griess试剂,比色仪灵敏度提高20倍;允许检测低浓度的NO2-和NO3-(最小可检测NO2/NO3量约为50nM)
NOS Activity Assay Kit781001NOS活性通过NOS监测放射性标记的精氨酸向瓜氨酸的转化

 

      DNA/RNA损伤:鸟嘌呤是DNA和RNA损伤时最容易氧化的碱基。为纠正这种损伤而启动的修复过程将下列氧化的鸟嘌呤类释放到尿液中:

      8-羟基鸟嘌呤——无核糖的碱

      8-羟基鸟苷——RNA的核苷

      8-羟基-2-脱氧鸟苷——DNA的脱氧核苷

 

      可以检测多种氧化鸟嘌呤种类的测定法比只限于分析一种(例如8-羟基-2-脱氧鸟苷)的测定法能捕获更多的氧化损伤生物学相关产物。

 

产品名称及描述货号指标说明
DNA/RNA Oxidative Damage (High Sensitivity) ELISA Kit5893208-羟基-2-脱氧鸟苷,8-羟基鸟苷和8-羟基鸟嘌呤单克隆抗体能够检测8-羟基-2-脱氧鸟苷(DNA氧化损伤标记物),8-羟基鸟苷(RNA损伤标记物)和8-羟基鸟嘌呤(DNA/RNA损伤标记物),对8-羟基-2-脱氧鸟苷有最高的选择性和灵敏度;尽管高斜率表明检测到其他未知物质,但与LC/MS测量的8-羟基-2-脱氧鸟苷相关
DNA/RNA Oxidative Damage (Clone 7E6.9) ELISA Kit5011308-羟基-2-脱氧鸟苷和8-羟基鸟苷单克隆抗体(克隆7E6.9)能够以相同的选择性和灵敏度检测8-羟基-2-脱氧鸟苷(DNA氧化损伤标记)和8-羟基鸟苷(RNA损伤标记);与LC/MS测量8-羟基-2-脱氧鸟苷和8-羟基鸟苷的组合相关

 

      蛋白质氧化和硝化:蛋白质氧化的最常见标志是蛋白质羰基含量。氧化还原循环阳离子与蛋白质结合,并与ROS的攻击结合,导致形成含有羰基(酮,醛)的氨基酸衍生物。香烟烟雾和醛类也会将羰基引入蛋白质中。另外,ROS暴露于蛋白质的蛋氨酸残基会产生蛋氨酸亚砜(MetO),这是一种氧化修饰,如果未被MetO还原酶逆转,则会进一步氧化为蛋氨酸砜,并可能导致蛋白质功能障碍。

 

      蛋白质上硝基酪氨酸的存在用作NO•与 O2•−反应时体内形成的过氧亚硝酸盐的标志物。当过氧亚硝酸盐经历杂化裂解时,释放出的硝化氮离子硝酸盐蛋白酪氨酸残基。NO•可以通过RNS介导的S-亚硝基化过程直接修饰蛋白质,其中NO•基团与蛋白质半胱氨酸残基的硫醇基结合,从而形成S-NO部分。

 

产品名称及描述货号指标说明
Protein Carbonyl Colorimetric Assay Kit10005020蛋白质羰基含量利用DNPH和蛋白质羰基之间的反应作为蛋白质氧化的读数
Methionine Sulfoxide Immunoblotting Kit600160含有MetO残基的蛋白质使用从兔血清中分离的MetO多克隆抗体,该抗体对MetO具有特异性,并且与蛋氨酸砜的交叉反应性最小
Nitrotyrosine IP Kit601220硝酸酪氨酸含量利用吸附剂与硝基酪氨酸单克隆抗体结合使用,以捕获和提取硝化蛋白
S-Nitrosylated Protein Detection Kit (Biotin Switch)10006518S-NO蛋白利用改良的生物素开关方法直接标记S-NO蛋白

 

 

S-Glutathionylated Protein Detection Kit10010721蛋白质-PSSG加合物利用改良的生物素开关方法直接标记蛋白质-PSSG加合物

 

      脂质过氧化:脂质过氧化导致不饱和脂质的高反应性和不稳定的氢过氧化物的形成。 它们可以通过不稳定的氢过氧化物的各种分解产物(例如烷烃,酮,醛)直接或间接评估。通过组织脂质的随机氧化产生的8-异前列腺烷目前被认为是体内脂质过氧化最可靠的生物标记之一。它是脂质过氧化作用的特定产物,其稳定且在所有正常生物体液和组织中的含量均可检测到。磷脂中酯化水平的测量可用于确定目标靶位点脂质过氧化的程度。

 

产品名称及描述货号指标说明
DHN-MA EIA Kit501140DHN-MA, a4-HNE meta bolite与人类,小鼠,大鼠,狗和猪的样品兼容
8-Isoprostane ELISA Kit5163518-异前列腺素使用AChE示踪剂进行过夜检测(孵育时间= 18小时);检测范围0.8-500 pg/ml;检出限(80% B/B0)约3 pg / ml
8-Isoprostane Express ELISA Kit5163608-异前列腺素使用AChE示踪剂4小时测定;检测范围2.5-1500 pg/ml;检出限(80% B/B0)约10pg / ml
STAT-8-Isoprostane ELISA Kit5004318-异前列腺素使用AP示踪剂检测速度极快(约2小时)。检测范围23.4-3000 pg/ml;检出限(80% B/B0)约45 pg/ml
Lipid Hydroperoxide (LPO) Assay Kit705002LPO设计用于单管分光光度计以读取结果
Lipid Hydroperoxide (LPO) Assay Kit (96 well)705003LPO设计用于可重复使用的玻璃板
TBARS Assay Kit10009055MDA-TBA加合物测定脂质过氧化的标准方法;用荧光法测量时,反应可产生更高的灵敏度,但可以选择比色法
TBARS (TCA Method) Assay Kit700870MDA-TBA加合物通过合并TCA沉淀程序,具有改进样品处理和减少工作量的优势;保持与原始TBARS分析相同的可靠性和准确性;包括样品酸沉淀方案以避免混淆可溶性TBARS

 

      更多氧化损伤产品,欢迎垂询艾美捷科技~

 

 

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