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全套线粒体研究工具,帮你“一网打尽”!

发布者:艾美捷科技    发布时间:2020-08-19     
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       线粒体是存在于所有真核细胞中的独特的膜结合细胞器,作为ATP生产和细胞能量供应的主要场所,线粒体的独特方面(包括称为mDNA的单独遗传物质,其自身的蛋白质合成机制以及严格调节的膜电位梯度)使其成为重要的研究课题,另外,随着衰老过程和更多其他人类疾病方面的研究发现,线粒体的作用比以往更加值得我们研究。

 

       这期主要给大家带来线粒体荧光探针(活细胞和固定细胞),线粒体膜电位探针,ATP检测,线粒体自噬检测,线粒体通透性转换孔(MPTP)检测相关工具。

 

       一.细胞线粒体染料

 

       1. 用于标记活细胞线粒体的可用MitoLite™染料

 

产品名称样品类型可固定Ex
(nm)
Em
(nm)
滤光
片组
规格货号对应试剂盒
MitoLite™蓝色FX490活细胞344469DAPI500 tests2267422665
MitoLite™绿色FM活细胞不行508528FITC10x50ug22695--
MitoLite™绿色EX488活细胞不行508528FITC500 tests2267522666
MitoLite™橙色EX405活细胞不行425522FITC500 tests2267922673
MitoLite™橙色FX570活细胞553576TRITC500 tests2267622667
MitoLite™Red FX600活细胞580598TRITC500 tests22677--
MitoLite™红色CMXRos活细胞579599TRITC10x50ug2269822668
MitoLite™深红色FX660活细胞640659Cy5500 tests2267822669
MitoLite™NIR FX690活细胞658691Cy5500 tests2269022670

 

       2. CytoFix™红色固定线粒体染色

 

      CytoFix™Red线粒体染色剂增强的细胞维持能力可使线粒体局部荧光得到保持,即使固定过程中线粒体膜电位丧失后也可以保留。该染料产生的荧光信号在溶酶体中得到很好的保留,使其便于长期跟踪线粒体。CytoFix™红色线粒体染色剂可与GFP表达的细胞,其他荧光偶联物和其他细胞器染色剂一起使用,进行多色分析。它既可用于悬浮细胞,也可用于贴壁细胞,并易于适应各种荧光平台。

 

       CytoFix™红色线粒体染色的特征:

 

      线粒体染色效率高

      固定后可长期保留

      操作时间短,标记步骤简便

HeLa细胞荧光图像

      图2.在96孔黑边框透明底板上用CytoFix™MitoRed染色的HeLa细胞的荧光图像。

 

       CytoFix™Red—适用于固定细胞线粒体染色

 

产品名称样品类型可固定Ex(nm)Em(nm)滤光片规格货号
CytoFix™红色线粒体染色活细胞540590Cy3 / TRITC500 tests23200

 

       二.线粒体膜电位:

 

      电子传输链产生的线粒体膜电位(ΔΨm)是健康的线粒体功能所必需的关键参数。与质子梯度一起,它产生了线粒体ATP合成背后的驱动力。它通过选择性消除功能异常的线粒体在线粒体稳态中发挥关键作用,并且是线粒体钙稳态的重要组成部分。

 

      凋亡早期的显着特征是正常线粒体功能的破坏, 线粒体膜的破坏和氧化还原电位可能会引起细胞活力的不必要损失,并成为导致各种疾病的原因。我们提供各种各样的荧光探针,用于分析活细胞中正常线粒体活性的各个方面,包括活性氧(ROS)产生,线粒体膜电位和钙通量。

        1. JC-10™双发射膜电位(ΔΨm)探针

 

       JC-10™是JC-1的衍生物,是电位依赖性探针,用于通过流式细胞仪,荧光显微镜和基于微孔板的荧光测定法确定ΔΨm。在健康细胞中,JC-10™选择性地聚集在线粒体中,生成橙色的JC聚集体,该聚集体在590 nm处显示出较宽的激发光谱和最大发射。然而,在具有低ΔΨm的凋亡和坏死细胞中,JC-10™从线粒体中扩散出来,并生成JC-10™单体,导致向绿色发射(525 nm)处转移。JC-10™允许以定性和定量方式来可视化ΔΨm的变化,分别考虑从橙色到绿色的荧光发射和荧光强度比的变化。它已成功用作多种样本类型的ΔΨm指示剂,包括肌细胞,神经元等。

 

       JC-10™的特点:

 

      易于使用:稀释到水性缓冲液中时,JC-10™不会沉淀,从而消除了伪影。

      坚固:JC-10™由于在水性介质中的溶解度提高和灵敏度更高,因此测定偏差较小。

      增强的信号:JC-10™具有比JC-1高的信噪比。

      增强的灵敏度:在所有测试的细胞系中,JC-10™能够比JC-1更好地检测到ΔΨm损失的细微变化。

      广泛的应用:JC-10™可用于原代大鼠肝细胞检测

      方便:JC-10™与荧光酶标仪,细胞成像仪和流式细胞仪兼容。

 

JC-10™

      图3.用JC-10™(货号22204)和JC-1(货号22200)在Jurkat细胞中测定了喜树碱诱导的线粒体膜电位变化。将Jurkat细胞用喜树碱(10 µM)处理4小时后,将JC-1和JC-10™染料加载溶液添加到孔中,并孵育30分钟。使用NOVOstar酶标仪(BMG Labtech)在Ex / Em = 490/525 nm和540/590 nm下测量了JC-1和JC-10™的J聚集体和单体形式的荧光强度。

 

       JC-10™和JC-1双发射线粒体膜电位探针

 

探针名称Ex/EmEx/Em滤光片组规格货号
JC-10™*替代JC-1 *508/524
(单体)
508/570
(聚合体)
FITC(单体)
TRITC(聚合体)
5x100ul22204
JC-1515/530
(单体)
515/590
(聚合体)
FITC(单体)
TRITC(聚合体)
5mg22200
JC-1515/530
(单体)
515/590
(聚合体)
FITC(单体)
TRITC(聚合体)
50mg22201

 

        2. 线粒体选择性罗丹明酯

 

      细胞渗透性阳离子罗丹明,例如TMRE和TMRM,很容易被活性线粒体隔离,通常用于标记活细胞中的线粒体。像JC-10™一样,线粒体中TMRE和TMRM的吸收是由线粒体膜电位驱动的。两种染料都已成功用于动态和原位定量检测,用于筛选线粒体通透性转换孔的抑制剂,评估活细胞中线粒体的功能,并可用于区分活的和死的细胞群,这些电位染料表现出最小的自发淬灭性,低细胞毒性和合理的光稳定性,它们的荧光强度可以用流式细胞仪或荧光显微镜进行测量。与TMRM相比,TMRE的疏水性略强。

 

       用于测量线粒体膜电位的电位染料

 

探测名称Ex(nm)Em(nm)滤光片组规格货号
TMRE [四甲基罗丹明乙酯] * CAS#:115532-52-0 *552574TRITC25mg22220
TMRM [四甲基罗丹明甲酯] * CAS#:115532-50-8 *552574TRITC25mg22221

 

       三.ATP测定

 

      三磷酸腺苷(ATP)是一种复杂的有机分子,参与细胞的能量生成,代谢调节和细胞信号传导。它作为主要能源存在于所有活生物体中,并在没有活生物体的情况下迅速降解。因此,ATP测定是一种有用的工具,可用于各种研究应用程序中,以鉴定活生物体的存在。常见的应用包括细胞活力和细胞毒性,表面细菌的检测,水中细菌的定量,培养中的体细胞以及食品质量和污染测试。

 

       我们的PhosphoWorks™发光ATP分析提供了一种快速,简单且均一的生物发光方法,可用于通过ATP检测确定哺乳动物细胞的细胞活力,细胞毒性和增殖。

 

       用于测量ATP活性,以及生成或消耗

 

产品名称Ex / Abs(nm)Em(nm)微孔板类型规格货号
PhosphoWorks™荧光ATP检测试剂盒540590黑色100 tests21620
PhosphoWorks™比色ATP检测试剂盒570--透明底100 tests21617
PhosphoWorks™发光ATP分析试剂盒*亮光*----白色1板21610
PhosphoWorks™发光ATP分析试剂盒*亮光*----白色10板21621

 

        四.线粒体自噬:

 

      线粒体自噬主要是由去极化线粒体的积累引起的。线粒体作为消除系统,消除了由氧化应激和DNA损伤引起的功能异常的线粒体,导致螯合成自噬体,然后与溶酶体融合并发生降解。

 

产品名称货号Ex/Em(nm)
Cell Meter 线粒体自噬荧光成像试剂盒22998510/580

 

       五.线粒体通透性转换孔(MPTP):

 

      线粒体通透性转换孔(MPT孔或MPTP)是由线粒体内膜和内层膜的组分形成的非特异性通道,可能参与细胞凋亡过程中线粒体组分的释放。在健康细胞中,MPTP在打开和关闭状态之间转换,但在细胞死亡期间,MPTP会极大地改变线粒体的通透性。细胞色素c的释放和线粒体膜电位的丢失发生在连续的孔活化之后。

 

产品名称货号规格
线粒体通透性转化孔(mPTP)检测试剂盒K239100 tests


 

      作为一家具有高端的技术实力、先进的经营管理水平和完善的市场销售体系的生物高科技企业,总部位于武汉光谷高新技术开发区,服务面向全国。艾美捷科技是集进口试剂、实验室耗材销售、技术服务与合约开发为一体的专业化高科技公司,为用户提供专业的前沿资讯、完备的产品、整合的解决方案,及优质的物流服务。为了更好的服务客户,公司组建了一支经验丰富的研发团队-艾美捷生物技术中心,进入研发生产阶段,将更优质的产品推荐给国内生物领域的同仁们!

 

      艾美捷科技与国内外优秀的生物试剂供应商优保持着密切的合作关系,目前已成为众多国际知名品牌的中国总代理或一级代理,主要包括:AmyJet、AAT Bioquest、Abnova、Agrisera、Biovision、Biosensis、Cayman Chemical、Caisson Labs、Cytoskeleton、CytoNiChe、Epigentek、Equitech-Bio、Hycult Biotech、Jackson、LifeSensors、LigaTrap、ProSpec、Norgen Biotek、Mabtech、Matreya、iRegene、StressMarq、ImmunoReagents、SouthernBiotech、Origene、US Biological、Solis BioDyne等,可以在短时间内为用户提供专业的前沿资讯、完备的产品及物流服务。

 

 

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