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【Biotium热销】细胞外囊泡(EV)染色第二弹——EXOBRITE CTB EV染色试剂盒

发布者:艾美捷科技    发布时间:2024-01-15     
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细胞外囊泡(EV)染色试第一弹:ExoBrite 细胞外囊泡(EV)染色试剂盒


值得信赖的细胞外囊泡(EV)工具——EXOBRITE CTB EV染色试剂盒

ExoBrite CTB EV染色试剂盒旨在克服外泌体检测的一些挑战。ExoBrite CTB EV染色剂与外泌体膜中的分子结合,通过流式细胞术对分离的 EV 进行明亮、特异性的染色。ExoBrite 染色剂的一个关键优势在于,与许多其他染料不同,它们几乎没有显示出与外泌体或 EV 大小相似的背景聚集体。此外,与大多数膜染料不同,ExoBrite 染料不会非特异性结合聚苯乙烯珠,这意味着它们可用于染色珠结合的外泌体。 

ExoBrite CTB EV染色剂已在流式细胞术中得到验证,因为它们能够染色来自几种不同培养细胞系的外泌体和 EV,并通过几种不同的方法分离,包括尺寸排阻色谱 (SEC)、聚乙二醇 (PEG) 沉淀和磁珠免疫沉淀 (IP)。  


ExoBrite CTB EV染色剂的优势:

  • 专为通过流式细胞术检测外泌体而设计

  • 明亮的荧光和低背景可实现出色的信噪比

  • 兼容抗体共染色(不同于CellBrite Fix 或MemBrite Fix)

  • 染色纯化或珠结合的外泌体

  • 提供4种颜色,用于灵活的实验设计

 

ExoBrite CTB EV.png

使用 ExoBrite? CTB EV 染色剂对SEC纯化的MCF-7衍生外泌体进行染色。

与其他外泌体/EV 染色剂相比,背景更少,覆盖率更好:

ExoBrite CTB EV-1.png

与其他经典染料或竞争染料相比,ExoBrite CTB EV 染色剂具有更少的背景和更完整的外泌体染色。使用尺寸排阻色谱 (SEC) 从 MCF-7 细胞上清液中纯化外泌体。纯化的外泌体在 PBS 中用指定的染料染色(顶行)。外泌体群体被门控,数字显示落入外泌体门内的颗粒百分比。每种染料也被添加到过滤的 PBS(底行)中,以寻找染料聚集和非特异性背景。红色箭头表示这些染料聚集体。像 DiO 这样的亲脂性染料显示出大量与外泌体大小相似的颗粒,这使得它们不适合外泌体染色。CellMask 还显示落在外泌体门内的染料聚集量不可接受。

 

ExoBrite? CTB EV-2.png

ExoBrite? 490/515 CTB EV染色用于染色SEC纯化的、Jurkat衍生的EV或人工脂质体。EVs染色牢固,但脂质体未染色。本实验中的脂质体由Presome ACD-1制备,并使用亲脂性染料di-8-ANNEPS验证其大小和浓度与EV相似(数据未显示)。在CytoFLEX流式细胞仪上进行分析,其中从405nm激光检测到SSC,并且ExoBrite 在FITC通道中检测到。Presome是日本NIPPON FINE CHEMICAL CO., LTD的注册商标。

ExoBrite? CTB EV-3.png

SEC纯化的MCF-7衍生EVs首先用100uL的ExoBrite 490/515 CD9染色,然后是10X ExoBrite 560/585 CTB EV染色。在CytoFLEX-LX流式细胞仪上在FITC和R-PE通道中检测EV。当我们关闭ExoBrite 560/585个CTB阳性颗粒中,约95%也对CD9呈阳性。


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产品名称Ex/Em检测通道规格货号
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Biotium公司是一家在荧光技术领域独树一帜的生物技术公司,公司位于美国加利福尼亚的BAY AREA------世界上首要的生物科技中心。该公司一直致力于开发和生产用于生物医学研究的荧光指示剂及其他特殊生化产品。其产品被广泛应用于细胞生 物学、蛋白质组学、分子生物学、免疫学、微生物学、诊断学、生物化学、神经科学、血液流动检测及大规模药物筛选等众多领域。Biotium公司专利产品众多,包括已经被广泛使用的实时PCR定量荧光染料EvaGreen、具有划时代意义的凝胶核酸染料Gel Red和GelGreen,以及最新推出的Cheetah Taq热启动酶和CF系列蛋白质标记染料等。   


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