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【新品上市】cGAS抑制剂筛选工具,肿瘤治疗新助力

发布者:艾美捷科技    发布时间:2021-06-09     
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cGAS-STING通路:

 

环状GMP-AMP(cGAMP)合酶(cGAS)是在哺乳动物细胞的细胞质中发现,cGAS酶能感知到本不应出现在细胞质的DNA时,会催化生成一种被称为环鸟腺苷酸(cGAMP)的小分子,二聚化的STING与cGAMP结合,构象发生变化,募集TBK1蛋白,磷酸化并激活干扰素调节因子 (IRF3) ,入核后的IRF3诱导 I 型干扰素,进而激活固有免疫。

 

cGAS-STING通路.jpg

cGAS生成的2'3'-cGAMP被STING识别,下游信号传导产生I型IFN和促炎细胞因子

 

病原体相关的DNA激活cGAS的活性和2'3'-cGAMP的产生对于宿主的防御很重要,但它们也可以在自身免疫疾病中发挥作用,这些疾病的主要特征是IFN刺激基因的表达增加,此外,cGAS被激活以响应线粒体DNA泄漏,这与癌症中的转移表型以及与年龄相关的炎症有关,并且染色体外端粒重复DNA的积累导致IFN表达和细胞增殖抑制。

 

病原体相关的DNA激活cGAS的活性.png

 

cGAS-STING通路与肿瘤免疫之间的联系

 

恶性肿瘤通常伴随细胞质中形成染色质片段和微核,因此,癌细胞中DNA泄漏的量相较于正常细胞大大增加,同时,来自于癌细胞的DNA被树突状细胞摄取的概率也增加了。因此,在癌细胞、树突状细胞中cGAS-STING通路被激活几率增加,进而产生了抗肿瘤的免疫作用。尽管cGAS-STING通路具有多种抗肿瘤作用,但持续的炎症和STING的慢性激活又可以反向地促进肿瘤的生长和转移,从而启动负反馈来下调免疫反应。

 

为了助力科研工作者进一步研究cGAS-STING通路对肿瘤治疗的作用,开曼生物的科学家们开发了一套检测试剂盒,以帮助研究人员筛选新型化合物,以帮助优化针关于cGAS-STING途径的新疗法。

 

cGAS抑制剂筛选试剂盒701930
这款cGAS抑制剂筛选试剂盒可用来鉴定和表征人cGAS的新型调节剂(抑制剂或激活剂),这个易于使用的试剂盒可分两个阶段,在大约三个小时内完成:

1.首先,在化合物存在情况下,将cGAS,DNA,ATP和GTP混合并添加到反应管中。

2.然后,通过使用特异性2'3'-cGAMP抗血清的通过竞争ELISA反应对该反应中产生的所有2'3'-cGAMP进行定量,通过测量2'3'-cGAMP的量,来确定cGAS酶的活性。

 

cGAS抑制剂筛选检测实验流程.jpg

cGAS抑制剂筛选检测实验流程:cGAS,DNA,ATP和GTP在反应管中与实验性调节剂混合,然后使用特异性抗血清通过竞争性ELISA测量反应产生的2'3'-cGAMP的量。

 

该试剂盒包含有活性的cGAS酶,必要的底物和所有测定所需的组分,包括缓冲液和96孔板,以方便进行ELISA实验。试剂盒中含有CU-76作为cGAS抑制剂的阳性对照,以确保适当的测定性能。研究人员只需要提供候选的cGAS抑制剂或激活剂,该试剂盒的功能强大且灵敏度极高:

标准曲线范围:4.57-10,000 pM,中点约为300 pM(50%B / B 0),

灵敏度(80%B / B 0):50 pM

这款功能强大的试剂盒可用来筛选cGAS的激活剂或者抑制剂,并可用于分析候选化合物的抑制剂效果,使用该试剂盒得到的示例数据如下:

对照组和cGAS抑制剂检测数据.jpg

对照组和cGAS抑制剂(CU-76)处理组各36个重复的检测数据

cGAS抑制剂CU-76对人重组cGAS的抑制作用.jpg

cGAS抑制剂CU-76对人重组cGAS的抑制作用,IC50值为108nM。培养基对照(Veh.)代表100%的初始活性。

 

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