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免疫球蛋白Y(IgY)亲和纯化填料,快速、简单从样本中纯化IgY

发布者:艾美捷科技    发布时间:2023-11-03     
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免疫球蛋白Y(Immunoglobulin Y,IgY)是鸟类(如鸡、鸭等)血清和蛋黄中的主要免疫球蛋白,可以识别和结合特定的抗原,鸟类通过产生IgY来应对感染和疾病,保护自身免受病原体的侵害。与免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)相比,IgY显示出明显的结构差异,其包含三个恒定的重结构域(与哺乳动物的两个结构域相反),并且缺少轻链和重链之间的铰链区域。IgY具有更长的半衰期,可以在鸟类体内更长时间地提供免疫保护。此外,IgY还具有较强的耐热性和耐酸性,这使得它在某些应用中具有优势。由于IgY的特殊性质和广泛的应用前景,研究人员和产业界对其进行了广泛的研究和开发。利用鸟类产生的IgY抗体,可以开发出各种应用,包括抗体生产、免疫诊断、生物制药等。同时,IgY亲和层析树脂也被广泛应用于IgY的纯化和富集过程中,以获得高纯度的IgY。


Immunoglobulin Y.png


Biogradetech可同时提供高品质的IgY亲和层析介质和预装柱,可以快速、简单从样本中纯化IgY:

类别货号规格原理
IgY亲和层析介质C-BETB012-10mL10mL高刚性嗜硫亲和层析介质,对于分子量较大的IgY有较高的结合载量,其原理是利用电子供体和电子受体之间的相互作用来分离纯化生物分子,这种作用力在高盐环境中得以加强,在低盐环境下减弱。
C-BETB012-100mL100mL
C-BETB012-50mL50mL
C-BETB012-250mL50mL
C-BETB012-500mL250mL
C-BETB012-1L1L
IgY亲和层析预装柱C-BETB012-1mL-Column1mL-Column
C-BETB012-5mL-Column5mL-Column


使用方法如下:

溶液制备

结合缓冲液:0.02 M PB,0.5 M K 2 SO 4 ,pH 7.5,0.45 μm 滤膜过滤。 

洗脱缓冲液:0.02 M PB,pH 7.5,0.45 μm 滤膜过滤。 

再生液:0.02 M PB,30%异丙醇,pH 7.5。  


平衡: 使用 3-5 倍柱体积(以下简称 CV)的 buffer A 清洗柱子,再使用 3-5 CV 的 buffer C 清洗,最后使用 3-5 CV 的 buffer A 平衡(平衡至基线)。

上样根据介质载量和工艺需求选择合适的样品量进行上样(固体样品请使用 buffer A 配制,液体样品可使用 buffer A 进行透析)。

淋洗:使用 3-5 CV 的 buffer A 清洗柱子(淋洗至基线)。

洗脱:使用 15 CV 的 buffer B 进行洗脱,并根据紫外峰收集洗脱样品。可以采用线性洗脱和阶梯式梯度洗脱两种方式进行。

再生:在进行一定次数的使用后(具体使用次数和上样中的污染物有关),需要对柱子进行再生,以下提供一种方法:首先用 3-5 CV 的纯水清洗层析柱,然后可用 0.02 M PB+30%异丙醇,pH 7.5 清洗 7-10 CV,再用纯水清洗 7-10 CV,最后用 20%乙醇冲洗 2-3 CV,并置于 4-30 ℃环境中保存。

在位清洗:为了避免不同样品间的相互干扰,或者当介质污染比较严重时(反压增加),需要对介质进行在位清洗。 

(1)对于以离子键结合的蛋白,可用 2-3 CV 以上的 2 M NaCl 清洗,并用 3 CV 以上的纯 水冲洗。 

(2)对沉淀蛋白、以疏水性结合的蛋白或脂蛋白,可用 2-3 CV 的 1M NaOH 清洗(10-20 min),并用 5-10 CV 平衡液和 3 CV 以上的纯水冲洗。 

(3)对疏水性结合的蛋白、脂蛋白和脂类物质,可用 5-10 CV 的 70%乙醇或 30%异丙醇 清洗(15-20 min),并用 5-10 CV 的纯水冲洗。 此外,也可用 2 CV 含去污剂的碱性或酸性溶液清洗。如用 0.1-0.5%的非离子去污剂+0.1 M 乙酸冲洗 1-2 h,并用 5-10 CV 的 70%乙醇冲洗去除去污剂,然后用 5-10 CV 的纯水冲洗。  


Biogradetech是全球生命科学和医药研发行业关键原料与试剂的领先供应商。他们提供广泛的产品组合,包括细胞生物学、蛋白质组学、分子生物学、免疫学、微生物学、诊断学、生物化学、神经科学、血液分析和高通量药物筛选等领域的试剂。Biogradetech的产品受到全球生物研究机构和生物制药公司的高度追捧,他们以高质量、可靠性和服务而闻名。   


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