人内毒素(ET)ELISA试剂盒：精准检测血清、血浆中内毒素浓度

内毒素，也称为脂多糖和脂多糖（LPS），是由脂质和多糖组成的大型分子，多糖由 O-抗原、外核心和内核心通过共价键连接而成；它们存在于革兰氏阴性菌的外膜中，并在动物体内引发强烈的免疫反应。

人内毒素（ET）ELISA 试剂盒是一种用于体外定量测量人血清、血浆、细胞裂解液和其他生物液体中内毒素（ET）浓度的 ELISA 试剂盒。

艾美捷人内毒素(ET)ELISA试剂盒：

货号：abx051541

靶标：内毒素（ET）

反应性：人

检测应用：ELISA

推荐稀释度：最终用户应确定最佳稀释度/浓度。

储存：运输时温度为 4 °C。收到后，请按照试剂盒说明书中的储存说明进行储存.

有效期：该试剂盒的有效期为 6 个月.

稳定性：试剂盒的稳定性由活性损失率决定。在适当的储存条件下，有效期内的损失率小于 5%。为了尽量减少性能波动，操作程序和实验室条件应严格控制。还强烈建议整个检测过程由同一位用户完成.

检测范围：0.015 EU/ml - 1.0 EU/ml

灵敏度：< 0.01 EU/ml

标准品形式：冻干

检测方法：比色法

检测类型：竞争法

检测数据：定量

样本类型：血清、血浆和其他生物液体.

靶标类型：抗原

检测原理：该试剂盒基于竞争酶联免疫吸附试验技术。96 孔板上预先包被有抗体。将标准品、测试样本和生物素偶联试剂加入到孔中并孵育。生物素标记的 ET 和未标记的 ET 在预包被抗体上发生竞争抑制反应。然后加入 HRP 偶联试剂，并将整个板孵育。在每个阶段使用洗涤缓冲液去除未结合的偶联物。使用 TMB 底物来定量 HRP 酶促反应。加入 TMB 底物后，只有含有足够 ET 的孔才会产生蓝色产物，加入酸性终止液后变为黄色。黄色的强度与板上结合的 ET 量成反比。在微孔板读数仪中以 450 nm 波长光谱光度法测量 OD，从而可以计算出 ET 的浓度.

试剂盒组成：列出的试剂盒组成仅供参考。产品说明书可能略有不同。产品应按照随产品一起提供的产品说明书中的说明使用.

预包被的 96 孔微孔板

标准品

标准品稀释缓冲液

洗涤缓冲液

检测试剂 A

检测试剂 B

稀释液 A

稀释液 B

TMB 底物

终止液

板封膜

所需但未提供的材料：

37°C 培养箱

多通道和单通道移液管及无菌移液枪头

喷雾瓶或自动微孔板洗涤器

1.5 ml 管

蒸馏水

吸水滤纸

100 ml 和 1 升量筒

微孔板读数仪（波长：450 nm）

ELISA 振荡器

试剂准备：此程序仅供参考。产品说明书可能略有不同。产品应按照随产品一起提供的产品说明书中的说明使用.

标准品：用推荐体积的标准品稀释缓冲液制备标准品溶液。然后按照协议中的指示，用标准品稀释缓冲液对标准品溶液进行系列稀释.

洗涤缓冲液：按照协议中的指示，用蒸馏水稀释浓缩的洗涤缓冲液.

检测试剂准备：计算所需的工作溶液的总体积。分别用稀释液 A 和稀释液 B 将检测试剂 A 和检测试剂 B 稀释 1:100.

检测程序：此程序仅供参考。产品说明书可能略有不同。产品应按照随产品一起提供的产品说明书中的说明使用.

设置标准品、测试样本和对照孔.

将 50 ?l 稀释后的标准品加入到标准品孔中.

将 50 ?l 标准品稀释缓冲液加入到对照（零）孔中.

将 50 ?l 稀释后的样本加入到样本孔中.

立即向每个孔中加入 50 ?l 检测试剂 A。在 37 °C 下孵育 1 小时.

洗涤 3 次.

向每个孔中加入 100 ?l 检测试剂 B。在 37 °C 下孵育 30 分钟.

洗涤 5 次.

向每个孔中加入 90 ?l TMB 底物。在 37 °C 下孵育 10-20 分钟.

加入 50 ?l 终止液.

在 450 nm 处测量 OD.

协议：此程序仅供参考。在使用前将试剂盒组分和样本平衡至室温（18 - 25 °C）。建议每次测试绘制标准曲线.

在预包被板上分别设置标准品、测试样本和对照（零）孔，然后记录它们的位置。建议每个标准品和样本至少重复测量两次.

将 50 ?L 的每个标准品、对照和样本加入到相应的孔中.

移除盖子并丢弃液体.

立即加入 50 ?l 检测试剂 A 工作溶液。用盖子封住板，在 37°C 下孵育 1 小时.

移除盖子并丢弃溶液。用 1X 洗涤缓冲液洗涤板 3 次.

向每个孔中加入 100 ?L 检测试剂 B 工作溶液，封住并孵育 37°C 30 分钟.

丢弃溶液并按照前一步骤用洗涤缓冲液洗涤板 5 次.

向每个孔中加入 90 ?l TMB 底物。用盖子封住板，在 37°C 下孵育 10-20 分钟。避免暴露在光下。孵育时间仅供参考，最佳时间应由最终用户确定。不要超过 30 分钟.

向每个孔中加入 50 ?L 终止液。立即在 450 nm 处读取.

结果计算：该检测是竞争性的，因此样本中 ET 浓度与测量的吸光度之间存在负相关。创建一个以标准浓度的对数（y 轴）和平均吸光度（x 轴）为坐标的图表。通过标准点应用最佳拟合趋势线。样本的 ET 浓度可以从标准曲线上插值得出.

可获得性：5-12 个工作日内发货.

注意事项：本品仅限研究使用.

范围和灵敏度可能会发生变化。为获得准确结果，样本浓度必须稀释至试剂盒的中等范围。请注意，Abbexa的 ELISA 和 CLIA 试剂盒针对的是天然样本的检测，而不是重组蛋白。Abbexa无法保证重组蛋白的检测，因为它们可能具有与天然蛋白不同的序列或三级结构。

标准品：1 EU/ml

批内精密度：CV ≤ 4.3%

批间精密度：CV ≤ 5.5%

数据示例：

图：显示人类内毒素（ET）标准OD数据的图表