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Worthington丨艾美捷代理卵清蛋白,低内膜,纯化:从鸡蛋到科学前沿的多面手

发布者:艾美捷科技    发布时间:2025-10-14     
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在生命科学实验室中,有一种蛋白质的地位堪比“明星演员”,它来源广泛、性质稳定、研究深入,既是基础研究的模型分子,也是应用技术中的关键试剂。它,就是源自蛋清的卵清蛋白(货号:WBC-LS003061)。作为鸡蛋蛋清中含量最丰富的蛋白质(约占54-65%),卵清蛋白远不止是一种简单的营养储存库。它是一个结构精巧、调控复杂且身世独特的糖蛋白,数十年来,一直吸引着生物化学家、分子生物学家和生物技术专家的目光。

 

 

一、分子结构:一幅精密的化学蓝图

卵清蛋白的分子结构如同一幅精心绘制的蓝图,每一个细节都蕴含着功能的信息。

基本组成:卵清蛋白是一个由385个氨基酸残基组成的单链糖蛋白,其理论分子量约为42.7kDa。它是一个单体蛋白,但在高浓度下可以观察到二聚体及少量三聚体的形式。

 

独特的翻译后修饰:

磷酸化:这是卵清蛋白一个著名的特征。每个分子上最多可以连接两个磷酸基团,修饰位点位于第68位和第344位的丝氨酸上。正是由于磷酸化程度的不同,通过电泳分离时,卵清蛋白会呈现出三条紧密相邻的条带,分别对应着去磷酸化、单磷酸化和双磷酸化的形式,如同“三胞胎”。

糖基化:它是一个糖蛋白,其糖链(由甘露糖和葡糖胺残基组成)通过天冬酰胺292位点连接。

二硫键与乙酰化:分子内包含四个半胱氨酸残基,形成一个稳定的胱氨酸二硫桥。此外,其N末端被乙酰化,这是其成熟形式的标志。

多态性:自然界中存在两种主要的卵清蛋白变异体——卵清蛋白A和卵清蛋白B。它们的区别仅在于第311位氨基酸:A型是天冬酰胺,而B型是天冬氨酸。这种微小的差异导致了它们等电点等的细微不同。

 

二、身世之谜:独特的生物合成与进化遗产

卵清蛋白在合成与进化上展现出的独特性,使其成为教科书级的经典案例。

奇特的信号肽:绝大多数分泌蛋白都带有一个位于N末端的“信号肽”,用于引导蛋白质进入分泌通路。然而,卵清蛋白的信号肽却位于多肽链的内部(第234-252位氨基酸)。这一发现挑战了当时的传统认知,揭示了蛋白质分泌机制的多样性。

与丝酶抑制蛋白(Serpins)的进化亲缘关系:令人惊讶的是,卵清蛋白的氨基酸序列与一类重要的蛋白酶抑制剂家族——丝酶抑制蛋白有约30%的同源性。丝酶抑制蛋白包括α1-抗胰蛋白酶等,它们在受到蛋白酶切割时会发生巨大的构象变化,从“紧张”态转为“松弛”态,从而“诱捕”并抑制蛋白酶。然而,卵清蛋白虽然结构同源,却丧失了这一抑制功能。它被蛋白酶切割后,不会发生类似的构象转变,其热稳定性也不随之改变。科学家认为,卵清蛋白是丝酶抑制蛋白家族的一个“分化”成员,它在进化过程中保留了结构框架,但可能转向了其他功能,例如作为营养储备。

激素调控的基因表达模型:卵清蛋白的合成是研究基因转录调控的黄金标准模型。在母鸡的输卵管中,卵清蛋白的基因表达受到雌激素等类固醇激素的强力诱导。其基因结构庞大,包含8个外显子和7个内含子,并且与另外两个功能未知的基因(X和Y基因)共同位于一个46kb的染色体区域内。过去数十年,科学家们利用这个系统,深入揭示了激素如何与受体结合,进而启动特定基因在特定组织中进行表达的复杂过程。尽管研究已非常深入,但其精确的调控机制至今仍吸引着科学家不断探索。

 

三、理化特性与应用

明确的理化特性是卵清蛋白得以广泛应用的基础。

关键参数:

等电点:约为4.5,这意味着在中性pH环境下,卵清蛋白带负电,这一性质被广泛用于其分离纯化。

消光系数:在280nm波长下的消光系数为30,590cm??M??(或E?%,???=7.16),这使得可以通过紫外分光光度法方便地对它进行定量。

 

广泛应用领域:

1.免疫学与生物医学研究:卵清蛋白是免疫佐剂和模型抗原的绝佳选择。在研究免疫反应、过敏症(鸡蛋是常见过敏原)以及疫苗开发的实验中,它常被用作一种安全、可控的外来抗原,刺激机体产生特异性抗体和T细胞反应。

2.药物与制药工艺:由于其良好的生物相容性和可修饰性,卵清蛋白被探索作为药物递送载体的潜力。同时,它也是制药工艺开发中用于测试纯化、过滤和稳定化技术的模型蛋白。

3.生物化学研究:作为蛋白质化学的“标杆”,卵清蛋白常用于校准分析仪器(如色谱柱、电泳胶)、研究蛋白质折叠/变性问题,以及作为酶解实验的底物。

 

总结

卵清蛋白,这个看似寻常的蛋清主要成分,实则是生命科学宝库中一颗璀璨的多面体。从它精细的磷酸化修饰和内部信号肽,到它与关键蛋白酶抑制剂家族的进化联系,再到其激素精密调控的基因表达模式,卵清蛋白持续为科学家提供着揭示生命基本规律的独特窗口。它不仅是我们餐桌上的营养来源,更是连接基础生物学发现与前沿生物技术应用的坚实桥梁,完美诠释了“于平凡处见非凡”的科学真谛。

 

参考文献:

Ahmad, F. and Salahuddin, A.

The Denatured State of Ovalbumin , Biochem J 128 , 49P , 1972

 

Ansari, A. , Ahmad, R. and Salahuddin, A.

The Native and Denatured States of Ovalbumin , Biochem J 126 , 447 , 1972

 

Ansari, A. , Kidwai, S. and Salahuddin, A.

Acetylation of Amino Groups and Its Effect on the Conformation and Immunological Activity of Ovalbumin , J Biol Chem 250 , 1625 , 1975


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