Worthington丨艾美捷代理新生儿心肌细胞分离系统，助力心脏研究

在心血管疾病研究、药物心脏毒性评估以及心脏发育生物学等前沿领域，获取高纯度、高活性的功能性心肌细胞是实验成功的基石。其中，新生儿大鼠心肌细胞因其仍保留一定的增殖能力，且能较好地在体外模拟心脏的生理与病理状态，而成为备受青睐的模型。然而，传统的心肌细胞分离方法常常面临诸多挑战：流程繁琐、耗时漫长，且不同批次间分离效果差异显著，严重影响了实验的可重复性与数据的可靠性。

为解决这一难题，新生儿心肌细胞分离系统（货号：WBC-LK003300）应运而生。这是一种经过精心设计和严格验证的标准化工具包，旨在为研究人员提供一种可靠、便捷且结果一致的新生儿大鼠心肌细胞分离方法。

一、可靠性与一致性的核心保障

该系统的卓越性能，源于其在两个关键环节的严格把控：

1、使用纯化酶制剂：与使用粗制酶的传统方法不同，该系统采用了经过高度纯化的胰蛋白酶和胶原酶。粗制酶中常含有各种杂酶和杂质，其活性和成分批次间差异大，是导致细胞得率与活性不稳定的主要元凶。而纯化酶制剂最大限度地减少了这种批间差异，确保了每次分离实验都能在高度一致的酶解条件下进行。

2、严格的性能验证：每一批次的试剂盒在出厂前，都经过了实际应用的“使用测试”。制造商使用该套系统亲自从新生儿大鼠心脏中分离心肌细胞，以确证其性能、可靠性以及所获得活细胞数量的稳定性。这种“以身试法”的质量控制体系，为研究者提供了强有力的信心保障。

二、科学原理与流程优化

该系统的方法学建立在坚实的科学研究基础之上。它基于Toraason等人发表的方法，并与Ronal MacGregor博士合作完成配方优化。其核心技术在于一个独特的 “冷消化” 步骤：

将剪碎的心脏组织与纯化的胰蛋白酶在2-8°C的低温环境下共同孵育过夜。这一巧妙的设计带来了显著的优势：

大幅减少手动操作时间：与传统方法中需要在温热的胰蛋白酶或胶原酶中进行多次、连续的孵育和吹打相比，漫长的冷消化过程由仪器自动控温完成，极大地解放了研究人员的双手，简化了工作流程。

温和而高效：低温下，胰蛋白酶主要作用于细胞间的连接，而不会立即对细胞本身造成剧烈损伤。这种温和、缓慢的消化方式有助于在后续步骤中释放出更多完整性好、活性高的细胞。

在冷消化之后，系统使用纯化的胶原酶 来进一步解离组织，最大化地提高最终细胞的总得率和存活率。

三、系统组件详解：一个完整的“工具箱”

该试剂盒设计周到，包含了进行五次独立组织解离实验（每次最多可处理12个心脏）所需的全部组件：

Vial 1：无菌Hank‘s平衡盐溶液（CMF HBSS）：一瓶500ml的钙镁离子游离溶液，pH 7.4。它用途广泛，既是用于重构其他冻干粉试剂的溶剂，也是整个解离过程中的基础培养基。

Vial 2：纯化胰蛋白酶（TRLS）：5小瓶，每瓶1000?g。该胰蛋白酶经过3X重结晶、透析，并通过0.22微米滤膜过滤和冻干处理，纯度极高。使用前需用2ml Vial 1中的CMF HBSS重构。

Vial 3：大豆胰蛋白酶抑制剂（SIC）：5小瓶，每瓶2000?g。同样为0.22微米过滤的冻干粉。其作用是在冷消化结束后迅速终止胰蛋白酶的活性，防止过度消化损伤细胞。使用前用1ml CMF HBSS重构。

Vial 4：纯化胶原酶（CLSPA）：5小瓶，每瓶1500单位。这是经过色谱纯化的胶原酶，酪蛋白酶杂质含量极低，确保了其解离作用的专一性和高效性。使用前需用5ml Leibovitz L-15培养基进行重构。

Leibovitz L-15 培养基粉末：1包，可配制1升。附有详细的配制说明，需用细胞培养级水溶解并定容后，经0.22微米滤膜无菌过滤方可使用。

此外，试剂盒还贴心地附带了5个细胞筛网（Cell Strainer），用于在分离末期滤除细胞团块和杂质，收集单细胞悬液；以及一张酚红颜色与pH值对照卡，方便研究人员快速判断溶液酸碱度。

四、广泛的应用生态与未来展望

该新生儿心肌细胞分离系统并非孤立存在，其制造商还提供一系列相关的酶制品（如不同型号的胶原酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶等）以及其他特定细胞类型的分离系统（如肝细胞分离系统、木瓜蛋白酶解离系统等）。这为研究者构建了一个完整的技术平台，允许他们根据不同的实验需求，灵活选择或优化细胞分离方案。

总结而言，这款新生儿心肌细胞分离系统通过其标准化的试剂、经过验证的流程和用户友好的设计，成功地将复杂且易变的心肌细胞分离工作，转化为一个高效、可控的标准化流程。它不仅显著提升了实验的重复性和效率，降低了人为操作误差和技术门槛，更是为推动心脏相关领域的科学研究走向深入与精准，提供了不可或缺的强大工具。

参考文献：

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Freshney, R. Ian., Culture of Animal Cells A Manual of Basic Technique, 4th ed. , Wiley-Liss, Inc., New York , 2000

Gross, W. , Schopf-Ebner, E. and Bucher, O.

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