Worthington丨艾美捷代理木瓜蛋白酶解离系统，无EBSS：解锁神经细胞研究

在神经科学研究的宏伟殿堂中，深入探索大脑和脊髓的微观世界，离不开一个关键前提：如何从复杂的神经组织中高效、温和地分离出具有活性的单个细胞。组织解离技术，正是打开这扇微观世界大门的钥匙。在众多方法中，基于木瓜蛋白酶的解离系统以其卓越的温和性与有效性，成为了众多研究者的首选，尤其是在获取原代神经元细胞方面。Worthington的木瓜蛋白酶解离系统，无EBSS（货号：WBC-LK003160），便是这样一套经过精心设计和严格测试的标准化工具集，它将复杂的酶解流程简化为一个便捷、可靠的试剂盒，为从新手到资深专家的广大科研人员提供了强大的支持。

一、系统概述：为神经细胞分离量身定制的解决方案

该系统的设计蓝本，源于Huettner和Baughman于1986年发表在《神经科学杂志》上的经典神经细胞分离方法。它旨在为研究人员提供最大的便利性与简易性，无论您是偶尔使用还是经验丰富的频繁用户，都能轻松上手。每一批次的试剂都经过了大鼠脊髓神经细胞分离实验的实际性能测试，确保其有效性。更重要的是，该试剂盒确保用户每次进行解离实验时，都能使用到新鲜配制的酶溶液，从根本上保证了实验结果的稳定性和可重复性。

在稳定性和储存方面，试剂在常规运输所需的室温条件下是稳定的，但收到包裹后，整个试剂盒应立即置于2-8°C冰箱中冷藏。在此条件下，盒内各组分可使用4-6个月。这种合理的保质期设计，为课题的持续开展提供了充足的窗口。

二、核心组件解析：四瓶协作的精密交响曲

该试剂盒包含了进行五次独立组织解离实验的全套材料（每次处理组织块体积约为0.3-0.4cm?）。其精妙之处在于四个小瓶的协同作用，每一瓶都承担着不可替代的关键角色：

1.Vial1：无菌Earle's平衡盐溶液——反应的基石与溶剂

这瓶100ml的EBSS是整套系统的基石。它不仅含有钙、镁、碳酸氢盐等维持生理渗透压和酸碱平衡的必要离子，还添加了酚红作为直观的pH指示剂。它的用途广泛：既是复溶其他冻干试剂瓶的溶剂，也被用于配制稀释的抑制剂溶液。使用守则强调，使用间隙需冷藏，且每次使用前需用无菌的氧气-二氧化碳混合气体进行平衡，以确保培养基的pH值处于生理范围。附赠的pH颜色对比卡正是为此步骤提供直观指导。

2.Vial2：木瓜蛋白酶——组织解离的“主攻手”

这是系统的核心酶，以5管100单位的单次用量小瓶提供。每瓶木瓜蛋白酶已与L-半胱氨酸和EDTA预先混合。L-半胱氨酸是激活木瓜蛋白酶原所必需的还原剂，而EDTA则通过螯合二价金属离子，抑制组织中的金属蛋白酶，从而保护细胞完整性。使用时，用5mlEBSS复溶后，即可得到每毫升含20单位木瓜蛋白酶、1mML-半胱氨酸和0.5mMEDTA的工作液。短暂的37°C温育能确保酶完全溶解并恢复至最佳活性状态，从而高效、温和地水解组织中的细胞外基质和蛋白质连接。

3.Vial3：脱氧核糖核酸酶I——清除“细胞黏胶”的清道夫

在细胞解离过程中，不可避免地会有部分细胞破裂，释放出genomicDNA。这些长链DNA会与完整的细胞缠绕在一起，形成黏稠的“胶状物”，严重妨碍单个细胞的释放与分散。DNaseI的作用正是在此关键时刻登场。它以5管2000单位的单次用量小瓶提供，用0.5mlEBSS复溶后即成高浓度工作液。它能迅速降解DNA长链，瓦解这种物理性黏附，极大地提高单个细胞的得率和悬液的流动性。操作时需注意避免剧烈混合，以防酶蛋白变性失活。

4.Vial4：卵类粘蛋白蛋白酶抑制剂——精准叫停反应的“终止符”

解离过程的控制至关重要，在木瓜蛋白酶完成其“切割”任务后，必须被及时、有效地终止，否则将过度损伤细胞。卵类粘蛋白蛋白酶抑制剂正是为此而设。它与牛血清白蛋白共同冻干于一瓶内，用32mlEBSS复溶后，即得到每毫升含10mg卵类粘蛋白抑制剂和10mg白蛋白的溶液。牛血清白蛋白能稳定抑制剂并保护细胞。在解离步骤末期，加入此抑制剂溶液能迅速中和木瓜蛋白酶的活性，将反应“定格”在最佳时刻，从而最大限度地保证分离细胞的活力和功能完整性。复溶后的溶液在2-8°C下可稳定保存。

三、应用价值与领域延伸

Worthington木瓜蛋白酶解离系统的核心应用领域在于原代神经细胞的制备，这些细胞是研究神经元电生理、突触传递、神经药理学、神经发育与退行性疾病的宝贵模型。其温和的特性使其特别适用于对酶敏感度高的神经元，能够较好地保留细胞表面的受体和离子通道。

此外，该系统所体现的“酶解-抑制”协同策略，也是细胞分离技术的通用黄金法则。在相关产品列表中，从胶原酶、透明质酸酶到中性蛋白酶和胰蛋白酶，我们可以看到针对不同组织类型（如肝脏、心脏、结缔组织）的定制化解离方案。木瓜蛋白酶解离系统正是这一庞大技术家族中，专为攻克神经组织这一“高地”而锤炼出的精锐武器。

参考文献：

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