单细胞多组学揭秘：显微镜下多血管炎的两种免疫学表型及PBL产品的临床应用价值

自身免疫性血管炎（AAV）是一种异质性自身免疫性疾病，其特征在于产生针对中性粒细胞胞质内分子的自身抗体，如髓过氧化物酶（MPO）和蛋白酶3（PR3）。AAV患者表现为小血管炎症，导致多器官损伤。尽管AAV有多种临床表现，但其临床异质性的免疫学基础仍不清楚。当前的治疗方案主要结合糖皮质激素和免疫抑制剂，如环磷酰胺或利妥昔单抗，但治疗策略尚未充分个性化。因此，准确预测预后和基于个体病例免疫学特征的最优治疗策略可能成为血管炎管理的一个范式转变。

这篇题为“Single-cell multi-omics analysis identifies two distinct phenotypes of newly-onset microscopic polyangiitis(单细胞多组学分析确定了两种不同的表型新发病的显微多血管炎)”的文章，发表于nature communications，通过单细胞多组学分析揭示了新发病例显微镜下多血管炎（MPA）的两种不同免疫学表型，并为个性化治疗和预后预测提供了临床见解。以下是对该文章的详细解析。

方法

为了识别MPA的免疫学表型，研究团队采用了单细胞RNA测序（scRNA-seq）技术，特别是结合了转录组和表面蛋白质组信息的CITE-seq技术，对8名新发病例、未经治疗的MPA患者和7名健康供体的外周血单个核细胞（PBMCs）进行了分析。同时，还使用了质量细胞计数技术（CyTOF）对PBMCs进行了进一步分析。

CITE-seq技术：CITE-seq技术允许在单细胞水平上识别已知细胞群内的多样性，并通过同时获取转录组和43种表面蛋白质的表达信息，为识别先前未报告的亚群提供了可能。

CyTOF技术：CyTOF技术通过时间飞行质谱分析，提供了PBMCs的高质量细胞计数数据，进一步验证了CITE-seq的结果。

实验设计

样本收集：从8名新发病例、未经治疗的MPA患者和7名健康供体中收集PBMCs。

CITE-seq分析：在10x Genomics平台上对PBMCs进行CITE-seq分析，同时获取转录组和表面蛋白质的表达信息。

CyTOF分析：对相同样本进行CyTOF分析，以验证CITE-seq结果。

数据分析：使用Milo框架进行差异丰度分析，识别MPA患者和健康供体之间细胞亚群的比例变化。

PBL Assay Science 41115-1产品的作用和价值

在实验中，PBL Assay Science的VeriKine-HS 人干扰素Alpha 所有亚型 ELISA 试剂盒（VeriKine-HS Human Interferon Alpha All Subtype ELISA Kit，货号41115-1）产品被用于测量血清中干扰素-α（IFN-α）的浓度。IFN-α是一种重要的免疫调节因子，在自身免疫性疾病中发挥关键作用。通过测量血清IFN-α浓度，研究团队能够：

验证ISG表达与IFN-α浓度的相关性：研究发现，ISG评分与血清IFN-α浓度呈正相关，这表明PBL Assay Science的VeriKine-HS 人干扰素Alpha 所有亚型 ELISA 试剂盒（VeriKine-HS Human Interferon Alpha All Subtype ELISA Kit，货号41115-1）产品提供的IFN-α浓度数据对于验证ISG表达的临床意义至关重要。

区分MPA表型：基于血清IFN-α浓度，研究团队能够将MPA患者分为MPA-IFN组（高IFN-α浓度）和MPA-MONO组（低IFN-α浓度）。这一分类对于理解不同MPA患者的免疫学特征和预后具有重要意义。

预后预测：血清IFN-α浓度不仅作为MPA-IFN组的临床标志物，还与患者的复发率和治疗反应相关。通过PBL Assay ScienceVeriKine-HS 人干扰素Alpha 所有亚型 ELISA 试剂盒（VeriKine-HS Human Interferon Alpha All Subtype ELISA Kit，货号41115-1）产品测量的IFN-α浓度数据，研究团队构建了预测MPA复发的接收者操作特征（ROC）曲线，实现了对MPA患者预后的准确预测。

个性化治疗指导：基于血清IFN-α浓度的测量，研究团队提出了针对不同MPA表型的个性化治疗建议。对于MPA-IFN组患者，由于其对免疫抑制治疗反应良好，可以考虑使用B细胞特异性疗法或抗IFN药物；而对于MPA-MONO组患者，由于其复发率高且对免疫抑制治疗抵抗，可能需要考虑其他治疗策略，如单核细胞靶向治疗。

结论

通过单细胞多组学分析，研究团队揭示了新发病例MPA的两种不同免疫学表型：MPA-MONO组和MPA-IFN组。这两种表型在单核细胞和ISG表达方面存在显著差异，并表现出不同的临床特征和治疗反应。特别是，PBL Assay Science 的VeriKine-HS 人干扰素Alpha 所有亚型 ELISA 试剂盒（VeriKine-HS Human Interferon Alpha All Subtype ELISA Kit，货号41115-1）产品在测量血清IFN-α浓度方面发挥了关键作用，不仅验证了ISG表达的临床意义，还帮助区分了不同的MPA表型，为预后预测和个性化治疗提供了重要依据。

主要发现

MPA特征：MPA患者PBMCs中活化的CD14+单核细胞和表达ISGs的CD14+单核细胞比例增加。

两组分类：MPA分为MPA-MONO组和MPA-IFN组，前者以高比例活化的CD14+单核细胞为特征，后者以高比例ISG+CD14+单核细胞为特征。

临床特征：MPA-MONO组患者单核细胞比例增加，复发率高；MPA-IFN组患者血清IFN-α浓度高，对免疫抑制治疗反应良好。

治疗反应：治疗前后分析显示，无论治疗方案如何，CD14Mono_Activated和CD14Mono_VCAN亚群增加，而CD14Mono_ISG亚群减少。

预后预测：血清IFN-α浓度和单核细胞比例可作为预测MPA复发的临床标志物。

研究意义与未来方向

这项研究不仅增进了对MPA免疫学基础的理解，还为MPA的临床管理和治疗提供了新的见解和方向。未来研究将进一步探索CD14+单核细胞和CD8+T细胞在MPA临床病程中的作用，并评估它们作为治疗靶点的潜力。此外，随着单细胞分析技术的不断发展，未来有望实现更加精确和个性化的血管炎治疗策略。

总之，PBL Assay Science的产品在本研究中发挥了重要作用，不仅验证了ISG表达的临床意义，还帮助区分了不同的MPA表型，为预后预测和个性化治疗提供了有力支持。这一研究成果为血管炎领域的研究和临床实践带来了新的启示和可能性。

PBL Assay Science提供各种干扰素亚型的蛋白，抗体和检测试剂盒。美国的PBL Assay Science（又名：Pestka Biomedical Laboratories, Inc.）成立于1990年，创始人Sidney Pestka被称为“干扰素之父”，PBL Assay Science 作为干扰素和细胞因子蛋白和抗体以及预包装的一流的干扰素和细胞因子免疫测定试剂盒的高质量制造商而享有盛誉。生产和销售的高品质干扰素产品和生物标志物检测试剂盒在很多高影响力出版物中都有引用，并已在具有挑战性的样本中进行了外部验证。