LifeSensors丨艾美捷基于凝胶的可定制体外E3泛素连接酶活性试剂盒（Alexa647）

UC201试剂盒是一种基于凝胶的体外泛素化试剂盒，旨在为研究人员提供一种简单、快速的实验方法。该试剂盒利用荧光标记的泛素-Alexa647进行E3连接酶活性检测，并通过SDS-PAGE凝胶电泳分离，使研究人员能够直接可视化和定量分析凝胶结果，从而节省宝贵的时间和试剂。与传统的基于Western blot的E3连接酶活性检测方法相比，该试剂盒操作更为简便，耗时更短。艾美捷作为LifeSensors的独家代理商，将详细介绍：

编号：UC-0201

分类：E1-E2-E3活性检测、试剂盒与平板、研究试剂盒

概述：

泛素是一种小分子（约8.6 kDa）多肽，能够通过其C末端与目标蛋白上的赖氨酸残基的氨基发生共价结合，这种结合过程被称为单泛素化。此外，还可以通过泛素分子上存在的七个赖氨酸残基中的任何一个，将更多的泛素分子连接到初始泛素上，形成泛素链，这一过程被称为多泛素化。其中，通过泛素分子上第48位赖氨酸（K48）形成的泛素链是最为人们所熟知的。单泛素化已被证明可以改变目标蛋白的定位、活性和/或功能。而多泛素化最常见的结果是通过蛋白酶体介导的目标蛋白降解。泛素与目标蛋白的结合需要三种不同酶的协同作用，即E1（泛素激活酶）、E2（泛素结合酶）和E3（泛素连接酶），最终在泛素的C末端与目标蛋白上的赖氨酸残基的ε-氨基之间形成异肽键。泛素E3连接酶作为支架蛋白，为泛素结合酶（E2）和目标底物提供结合位点。通常情况下，E3连接酶介导泛素从E2硫酯中间体转移到目标蛋白的酰胺键上（Hershko和Ciechanover，1998）。除了对底物进行泛素化外，E3连接酶还可以自身泛素化。这一特性被用于体外实验中，以监测E3连接酶的活性。本试剂盒基于凝胶的体外泛素化实验，操作简单、快速且易于使用。E3连接酶实验采用荧光标记的泛素-Alexa647进行，并通过SDS-PAGE凝胶电泳分离，使研究人员能够直接可视化和定量分析凝胶结果，从而节省宝贵的时间和试剂。与传统的基于Western blot的E3连接酶活性检测方法相比，该试剂盒操作更为简便，耗时更短。

LifeSensors基于凝胶的可定制体外E3泛素连接酶活性试剂盒试剂盒组成：

10倍浓缩检测缓冲液

可选E3连接酶

可选E2结合酶

泛素激活酶E1

泛素混合物

ATP

阳性对照E3与E2（Carp2与UBE2D3，20倍）

6倍SDS凝胶上样缓冲液

注意事项：

储存：所有组分应储存于-80°C。

稳定性：除预涂平板外，所有组分在-80°C储存时至少稳定2个月。平板必须在30天内使用。

重要提示：选择合适的链霉亲和素试剂对于产生强信号至关重要。不建议使用辣根过氧化物酶（HRP）结合的链霉亲和素。

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更多凝胶的可定制体外E3泛素连接酶活性试剂盒信息，详询LifeSensors独家代理商艾美捷科技。