ProFoldin 96孔蛋白质折叠板为蛋白质折叠筛选提供了96种多样化的条件。这96种折叠条件包括不同的pH值、盐浓度和添加剂。每次实验使用母板中的100微升溶液。每个母板的每个孔中都含有500微升溶液,可用于多次折叠各种蛋白质的实验。每种条件下使用约20微克的盐酸胍溶解的包涵体蛋白。一旦确定了折叠条件,就可以为特定条件(孔位)提供制备规模折叠的制备折叠溶液。
艾美捷ProFoldin-96孔蛋白折叠板:
代码:PFS096
组成:一个含有96种蛋白质折叠溶液的96孔板,母板的每个孔中都有500微升溶液;1.4毫升包涵体溶解剂;4毫升中和剂和一个透明的96孔板。
蛋白质折叠操作步骤:
样品准备:请参阅包涵体制备的协议。蛋白质浓度约为10毫克/毫升。
板准备:将板以1000xg的速度离心1分钟,使所有溶液都收集到孔底。轻轻取下板盖,将100微升溶液转移到透明板中。在4℃下预孵育板,并在整个蛋白质折叠过程中将试剂保持在4℃。
稀释:将上述2微升蛋白质溶液稀释到每个孔中的溶液中。然后在4℃下孵育板4小时。
中和:将8微升中和剂与每个孔中的溶液混合。在4℃下孵育板过夜。
折叠产物分析
溶解度 :未折叠的蛋白质会形成肉眼可见的沉淀,可通过在405纳米(OD405)处的光散射测量来检测。溶解的蛋白质可以通过SDS - PAGE进行分析。为此,将板以1000xg的速度离心10分钟,然后将每个孔中的10微升上清液与10微升水和7微升4xSDS - PAGE上样缓冲液混合。
活性测试 :使用活性测定(催化或结合活性)来检查蛋白质活性。在测定中将折叠产物稀释10到20倍。例如,如果测定反应体积为100微升,则在每次反应中加入5到10微升的折叠产物。
对于功能未知或无可用测定的蛋白质 :折叠良好的蛋白质可以通过离子交换、亲和或凝胶排阻色谱柱在天然缓冲液中进行纯化。CD或SEC - MALS分析仅适用于纯化的蛋白质样品。
ProFoldin-96孔蛋白折叠板相关产品:
旋转柱蛋白质折叠筛选试剂盒 SFC01 - 10
稀释膜蛋白折叠筛选试剂盒 MPS10 - 20
旋转柱膜蛋白折叠筛选试剂盒 MFC01 - 20
膜蛋白提取试剂盒 MPE01 - 12S
易用蛋白质测定试剂 EPA001
核酸去除试剂盒 NAR911
蛋白质稳定性和聚集测定试剂盒 PSA200
ProFoldin专注于蛋白质科学领域的研究与开发。ProFoldin提供一系列与蛋白研究相关的产品和服务,包括蛋白除盐、蛋白折叠、膜蛋白提取、聚合酶、高通量检测试剂和荧光染料等。其中蛋白折叠柱和试剂、膜蛋白提取试剂盒为特色产品,成为了广大科研工作者研究蛋白尤其是膜蛋白有力的科研工具。
艾美捷科技是ProFoldin的中国代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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